PCSK9拮抗剂干预心梗大鼠心肌细胞凋亡及炎症因子表达的机制研究.pdfVIP

PCSK9拮抗剂干预心梗大鼠心肌细胞凋亡

及炎症因子表达的机制研究

作者：冯华代涛陈铁谭力力潘淼孙颖张秀春

来源：《中西医结合心血管病电子杂志》2020年第09期

【摘要】目的研究PCSK9拮抗剂干预心梗大鼠心肌细胞凋亡及炎症因子表达的机制研

究。方法选择我院2017年9月～2018年9月大鼠12例，其中对照组4例，缺血再灌注6h、

12h各4例，观察其心肌细胞凋亡情况与炎症因子。结果再灌注6h、12h出现凋亡细胞所特

有的DNA图谱，且灌注时间越长，梯状条带越明显，提示细胞凋亡程度加重。缺血再灌注12

h组在各项炎症情况上均高于对照组、缺血再灌注6h，差异显著，差异有统计学意义（P

【关键词】PCSK9拮抗剂;心梗大鼠;心肌细胞;炎症因子

【中图分类号】R969.4【文献标识码】A【文章编号】ISSN.2095.6681.2020.9..02

细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤的主要发病环节之一，而细胞凋亡的多少与缺血再灌注损

伤程度存在一定联系[1]。人类前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）是生物信息方法与DNA

微阵列技术中，发现的新的血液胆固醇代谢相关的基因。而目前有研究指出，PCSK9在胆固

醇代谢中起到较为重要的作用，并参与细胞凋亡[2]。但PCSK9在心肌缺血再灌注中，是否存

在表达，与心肌缺血之间是否存在联系，研究较少[3]。本文通过将心梗大鼠进行研究，观察

PCSK9拮抗剂对心肌细胞凋亡与炎症抑制的表达意义，内容如下。

资料1与方法

一般资料1.1;

选择2017年9月～2018年9月我院培养的12例大鼠，其中对照组4例，缺血再灌注6

h、12h各4例。

方法1.2;

均为健康雄性大鼠，按照清洁级动物分笼饲养，适应性喂养1周后，按照随机的原则进行

分组。其中对照组为假手术组，只穿线不结扎，观察6h。所有大鼠均自由饮水。

使用10%水合氯醛麻醉腹腔注射大鼠，并进行颈部气管插管，使用动物人工呼吸机进行机

械辅助呼吸，在胸骨左侧1cm做一纵向切口，打开胸腔，在左心耳根部下方2mm处进针动

脉圆锥旁出针，放松活结即可恢复血流形成再灌注。实验中观察心电图，出现ST段提高或深

Q波形成并结扎线以下左心室壁，颜色变灰白，表明模型制备成功，结扎45min后开放阻断

钳，并仔细缝合切口，将腹腔内剩余气体抽尽，并观察大鼠自主呼吸情况，仔细缝合气管切

口。手术结束后肌肉注射青霉素，积极预防感染，并适当保暖，喂养生理盐水。对照组仅开胸

穿线，但不结扎冠状动脉。在实验终点吗，需要收集血液及缺血区心肌组织，心肌组织使用

PBS漂洗，立即置液氮中冷冻保存，血液于室温静置2h，3000rpm离心20min后吸取上层血

清，于-20℃保存。

观察1.3;指标

观察缺血/再灌注大鼠心肌组织细胞凋亡情况。

采用ELISA法检测C反应蛋白（CRP）、白细胞介素6（IL-6）及肿瘤坏死因子α（TNF-

α）炎症因子情况[4]。

统计学1.4;方法

均采取SPSS19.0统计软件对本文数据进行分析计算，在计算计数资料的时候采取x2，选

择n（%）进行表达，计算计量数据的时候采取t，选择（x±s）表达，其中当P

结2果

缺血2.1;/再灌注大鼠心肌组织细胞凋亡情况

使用DNA试剂盒提取各试验组大鼠心肌中的DNA，經过琼脂糖凝胶电泳检测，其中再灌

注6h、12h出现凋亡细胞所特有的DNA图谱，且灌注时间越长，梯状条带越明显，提示细胞

凋亡程度加重。

不2.2;同大鼠之间炎症表达情况

缺血再灌注12h组在各项炎症情况上均高于对照组、缺血再灌注6h，差异显著，差异有

统计学意义（P

讨3论

目前我国心血管疾病发病率与死亡率逐年出现上升趋势，而缺血性心脏病主要是由于多种

原因导致的冠脉血流量不足，难以满足心肌对能量所导致的心肌损害。目前主要采取冠脉搭桥

或溶栓治疗，能够改善患者心肌血流供应，并保护缺血心肌，但术后并发症较多，使得效果并

不理想[5]。而心肌缺血再灌注是多种作用下的病理作用，其作用机制目前并不清楚，但需要

进一步明确心肌缺血再灌注损伤的机制，为临床治疗提供新理论。

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