大鼠血清雌激素水平测定方法总结 .pdfVIP

大鼠血清雌激素水平测定方法总结 .pdf

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1、酶联免疫吸附实验(ELISA)

即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面

进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、

载体易于标准化等优点。

2、放射免疫分析(英语:radioimmunoassay,缩写为RIA)

简称放免或放免法,是一种在无须采用生物测定方法的情况下,用于检测抗原(例

如血清之中激素的水平)的实验室测定方法。这一方法是由罗莎琳·萨斯曼·耶洛和

SolomonAaronBerson于1950年代创建的。

通过抽取的少量血液或病人标本,利用放射性核素标记的抗原和未标记的抗原(两

者的免疫原性相同)对专一抗体的竞争性相结合反应,来分析测定体内抗原的含量。放

射免疫分析法具有灵敏性高(可达10-12g~10-15g)。

3、免疫荧光法(免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)FIA)

是标记免疫技术中发展最早的一种。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光

抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。

主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序

也还比较复杂。

4、化学发光免疫分析(CLIA)

亦称化学发光标记免疫测定,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体(化学发光剂

标记物),与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结

合状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入发光促进剂

进行发光反应,通过对发光强度的检测进行定量或定性检测。

5、时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析(time-resolved

fluoroimmunoassay,TRFIA)

是以具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合剂作为示踪物,建立的一种新型的非

放射性微量分析技术。自从1983年Pettersson等采用时间分辨荧光免疫分析

(TRFIA)法定量测定hCG以来,TRFIA方法学研究和临床应用发展迅速,成为继

RIA之后标记免疫分析发展的一个新的里程碑,国内外相继研制了多种TRFIA仪和配

套的商品化试剂盒。

是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵

敏度高达10^(-12)g/ml,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。它用镧系元素标记

抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测

波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了

分析灵敏度。由于其高灵敏度,在临床上得到了广泛的应用,逐渐代替了放射免疫分

析。

缺点是E2的线性浓度范围为2.5-200pg/ml.

???正常值

检测方法检测范围

常规免疫mg~μg(10-3~10-6g)

荧光免疫,酶免疫μg~ng(10-6~10-9g)

放射免疫,发光免疫ng~pg(10-9~10-12g)

PCRpg~fg(10-12~10-15g)

这些正常检测范围等没有统一的说法,但可以肯定的是TRFIA最优。

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