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紫外可见分光光度计的应用

紫外可见分光光度法

摘要本文介绍了紫外可见分光光度法的发展、原理、特点及应用，

并列举多项实例说紫外可见分光光度法在各个领域中的应用。

关键词有机分析吸收光谱紫外可见分光光度法

1.发展

人们在实践中早已总结出不同颜色的物质具有不同的物理和化学

性质。根据物质的这些特性可对它进行有效的分析和判别。由于颜色

本就惹人注意，根据物质的颜色深浅程度来对物质的含量进行估计，

可追溯到古代及中世纪。1852年，比尔(Beer)参考了布给尔

(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了

分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的

浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著名的比尔

朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此

理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年，

美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见

分光光度计经不断改进，又出现自动记录、自动打印、数字显示、微

机控制等各种类型的仪器，使光度法的灵敏度和准确度也不断提高，

其应用范围也不断扩大。

紫外可见分光光度法从问世以来，在应用方面有了很大的发展，

尤其是在相关学科发展的基础上，促使分光光度计仪器的不断创新，

功能更加齐全，使得光度法的应用更拓宽了范围。目前，分光光度法

已为工农业各个部门和科学研究的各个领域所广泛采用，成为人们从

事生产和科研的有力测试手段。我国在分析化学领域有着坚实的基础，

在分光光度分析方法和仪器的制造方面国际上都已达到一定的水平。

2.原理

物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中

的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能

级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分

子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就

有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波

长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性

和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质

的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)

定律。即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。

物质的颜色和它的电子结构有密切的关系，当辐射(光子)引起电子

跃迁使分子(或离子)从基态上升到激发态时，分子(或离子)就会在可见

区或紫外呈现吸光，颜色的发生或变化是和分子的正常电子结构的变

形联系的。当分子中含有一个或更多的生色基因(即具有不饱和键的原

子基团)，辐射就会引起分子中电子能量的改变。常见的生色团有：

CO，-N=N-，-N=O，-CN，CS

如果两个生色团之间隔一个碳原子，则形成共轭基团，会使吸收

带移向较长的波长处(即红移)，且吸收带的强度显著增加。当分子中含

有助色基团(有未共用电子对的基团)时，也会产生红移效应。常见的助

色基团有：-OH-NH2，-SH，-Cl,-Br,-I。

3.特点

分光光度法对于分析人员来说，可以说是最有用的工具之一。几

乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。分光光度法的主

要特点为：

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收，因此均

可借此法加以测定。到目前为止，几乎化学元素周期表上的所有元素

(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。在国际上发表的有

关分析的论文总数中，光度法约占28%，我国约占所发表论文总数的

33%。

(2)灵敏度高

由于新的显色剂的大量合成，并在应用研究方面取得了可喜的进

展，使得对元素测定的灵敏度有所推进，特别是有关多元络合物和各

种表面活性剂的应用研究，使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万

提高到数十万。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度

法测定，如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定，已有比较满意的

方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法，其浓度测量的相对误差在1～3%范围内，

如采用示差分光光度法进行