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ｌ４１２ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｈｙｓｉｃｉａｎＯｃｔｏｂｅｒ，２００７，Ｖｏｌ９，Ｎｏｌ０
ＷＴ１基因在骨髓增生异常综合征中表达的临床意义
白晓玲。，葛林阜，许波。，郑楠。，姜国胜，唐天华
（济南军区总医院１．儿科，山东济南２５００３１；２．血液科；３．山东省医学科学院血液肿瘤室）
【摘要】目的探讨ＷＴ１基因表达在骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）中表达的意义。方法采用筑巢式ＲＴ．ＰＣＲ观察２７例
ＭＤＳ患者ｗＴｌ基因表达的相对水平。结果２７例ＭＤＳ表达阳性率２９．６％，其中ＲＡ组明显低于ＲＡＥＢ及ＲＡＥＢＴ组，其表达阳性
率逐渐增高，差异有统计学意义。结论ｗＴ１基因在ＭＤＳ患者中高表达，与ＭＤＳ疾病进程关系密切，可作为对ＭＤＳ疾病发展的高
危评估，监测治疗效果，判断预后。
［关键词】骨髓增生异常综合征；基因，肾母细胞瘤
ｗＴｌ基因是从Ｗｉｌｍ￣ｔｕｍｏｕｒ细胞的染色体１１Ｐ１３分离出见图１及表１。
来的Ｗｉｍｇｌ瘤基因。近年来许多学者发现ｗＴｌ基因与造血系
￣Ｉｌ２３４５６Ｋ
统肿瘤发病有关Ｊ。笔者采用筑巢式逆转录．聚合酶链反应
（ＲＴ·ＰＣＲ）方法，测定了２７例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）ｗＴｌ
基因的表达，了解ＷＴ１基因在ＭＤＳ不同阶段的表达情况，以探ｂｐ
４３４ｂｐ．——
讨该基因在ＭＤＳ的发生、发展中所起的作用及与疾病预后的ＷＴｌ
关系。２６７ｂｐ．——Ｂ—ａｃｔｉｎ
２３４ｂＤ～
１资料与方法
１·１一般资料１９９８年６月一２００４年８月本院住院及门诊
患者共２７例，ＭＤＳ诊断和分型采用ＦＡＢ标准。ＭＤＳ中男ｌ９
例，女８例，年龄５～５２（平均３９）岁。２７例患者中难治性贫血
（ＲＡ）１２例，原始细胞增多性难治性贫血（ＲＡＥＢ）７例，转化型
原始细胞增多性难治性贫血（ＲＡＥＢＴ）８例，另选健康查体者ｌ２图筑巢式ＲＴ１－ＰＣＲ检测ＷＴ１基因表达Ｍ：ｐＢＲ３２２／ＨａｅⅢＤＮＡ
例及非恶性造血系统疾病患者（如类白血病反应、嗜酸细胞增Ｍａｒｋｅｒｓ；１—６：ＭＤＳ标本；Ｋ：Ｋ５６２细胞
表ｌ骨髓增生异常综合征患者ｗＴｌ基因表达水平（例）
多征、缺铁性贫血等）ｌ０例骨髓标本或外周血为阴性对照，白
血病细胞株Ｋ５６２细胞为阳性对照。
１．２实验方法
１·２·ＲＮ１Ａ提取取骨髓１—１．５ｍｌ和（或）外周血３～５
ｍｌ，２％ＥＤＴＡ抗凝，分离单个核细胞（ＭＮＣ），采用异硫氰酸胍．
苯酚．氯仿一步法提取总ＲＮＡＪ。
１·２·２ＰＣＲ引物及产物ＷＴ１引物序列设计参照文献
［４］，扩增片段３４３ｂｐ；内采用Ｂ－ａｃｔｉｎ引物。
１·２·３逆转录ｃＤＮＡ合成及ＷＴ１引物巢式ＰＣＲ扩增及半３讨论
定量分析参见文献［４］。造血细胞增殖和分化异常是包括ＭＤＳ在内的许多恶性造
１·３统计学处理计数资料采用精确概率法。血系统疾病的主要原因。ｗＴ蛋白是一种双向
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