骨髓间充质干细胞早期局部移植修复碱烧伤角膜的研究的开题报告.pdf

异基因骨髓间充质干细胞早期局部移植修复碱烧伤角膜的

研究的开题报告

一、研究背景

碱烧伤是指眼部受到碱性物质的侵袭所引起的角膜损伤，它可以导致角膜上皮细

胞坏死、瘢痕形成、视力下降等一系列不良后果。目前，治疗碱烧伤的方法主要有局

部应用抗炎药物、角膜移植等，但这些治疗方法并不能完全修复受损的角膜组织，且

容易出现各种并发症。因此，寻找一种新的治疗方法来修复碱烧伤角膜显得尤为重要。

干细胞移植已成为一种治疗碱烧伤角膜损伤的新方法。间充质干细胞（MSCs）

具有自我更新和多向分化的能力，可分化为多种细胞类型，并能参与组织修复和再生。

耳前蒂脂肪干细胞（ADSCs）和骨髓间充质干细胞（BMSCs）是其中应用较为广泛的

两种来源。

BMSCs已被证明能够增加受损组织的再生能力。异基因骨髓间充质干细胞

（allogeneicBMSCs）在移植迟发性应答方面具有很强的免疫耐受性，进而能够降低移

植的排异反应。因此，本研究旨在探讨异基因BMSCs早期局部移植修复碱烧伤角膜的

疗效。

二、研究内容与方法

1.研究内容

本研究将选择24只家兔，分为两组，即实验组和对照组。在实验组家兔的动物

模型中，将使用异基因BMSCs早期局部移植的方法来修复其碱烧伤角膜。对照组家兔

将进行传统的治疗，如局部应用抗炎药物等。

2.研究方法

2.1建立碱烧伤角膜的动物模型

使用25%氢氧化钠制备碱烧伤角膜的动物模型。使用角膜镊将家兔的眼睑固定，

从眼泪小管处倒入5μl的25%氢氧化钠，在角膜中央区域（直径为5mm）停留30秒，

随后用0.9%氯化钠水溶液冲洗角膜3分钟。

2.2BMSCs分离和培养

选择健康的异基因BMSCs进行分离和培养。将骨髓中的间充质细胞通过贴壁法

分离，经过三代传代后，以PBS进行洗涤，并使用1ml注射器收集细胞，通过离心将

培养物中的细胞沉淀下来。再将其平均分配至不同的培养皿中，使无血清DMEM/F12

培养液中的细胞密度为10^5/ml。细胞的培养环境为37℃，5%CO2，连续培养14天

后，BMSCs准备完毕。

2.3BMSCs移植

在碱烧伤后的第三天，选择合适的BMSCs数量通过局部注射的方式移植至家兔

眼球。分为三个组别分别注入1×10^6,2×10^6,3×10^6个BMSCs，注射在病变处周

围。每组两只，一只移植细胞和另一只注射PBS作为对照。

2.4角膜的评估

在移植BMSCs后的第7天、14天和21天，对家兔进行角膜的评估，包括眼部

外观检查、眼压测定、裂隙灯显微镜检查等。

三、预期结果与意义

本研究旨在探究异基因BMSCs早期局部移植修复碱烧伤角膜的疗效，并通过多

种评估指标对治疗效果进行评估。预计通过本项研究，可以为治疗碱烧伤角膜提供一

种新的治疗方法，并且具有很强的应用前景。