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人源抗TNF-α骆驼化抗体的制备研究的开题报告

一、选题背景与意义

TNF-α是一种T淋巴细胞产生的细胞因子，在机体的免疫反应、炎

症反应、细胞凋亡、肿瘤发生等方面都发挥着重要的作用。在某些疾病

的发生过程中，特别是类风湿关节炎、克罗恩病、结肠炎等自身免疫疾

病中，人体血液中的TNF-α水平显著升高，导致炎症反应加剧。因此，

抑制TNF-α的生物学效应，成为了治疗这些疾病的关键之一。

TNF-α的抗体是抑制其生物学效应的主要策略之一，抗TNF-α单克

隆抗体（mAb）已经成为治疗类风湿关节炎、克罗恩病、结肠炎等自身

免疫疾病的标准疗法。目前市场上的抗TNF-α单克隆抗体主要有英夫利

昔单抗（Infliximab）、阿达鲁木单抗（Adalimumab）、高尔司肽单抗

（Golimumab）等，这些抗体均为外源抗体，并存在着免疫原性、耐药

性等问题。为了解决这些问题，开发人源化、骆驼化的抗TNF-α单克隆

抗体，已经成为当前抗体药物制备的研究热点。

二、研究内容与方法

本研究旨在制备一种人源抗TNF-α骆驼化单克隆抗体，具体研究内

容如下：

1.构建骆驼源天然单克隆抗体文库。从天然阳性骆驼血清中筛选出

对人TNF-α高亲和性的单克隆抗体，并利用RT-PCR技术将其DNA序列

克隆到表达载体中。

2.表达和纯化骆驼化单克隆抗体。将构建好的表达载体转染到选择

性细胞系中，并进行大规模发酵和纯化，得到骆驼化抗体。

3.人源化。利用人-骆驼嵌合抗体的策略，人源化骆驼化抗体。选取

骆驼化抗体中的可变区，将其与人IgG的框架区连接起来，得到人源化

骆驼化抗体。

4.表达和纯化人源化骆驼化抗体。将人源化骆驼化抗体的表达载体

转染到选择性细胞系中，并进行大规模的发酵和纯化，得到制备好的人

源化骆驼化抗体。

三、预期结果与意义

本研究的最终目标是制备一种高活性、高亲和力、无免疫原性和易

于大规模生产的人源抗TNF-α骆驼化单克隆抗体。该抗体可以用于治疗

类风湿关节炎、克罗恩病、结肠炎等自身免疫疾病，解决外源抗体存在

的免疫原性、反应性等问题，提高治疗效果和疗效持续时间，具有重要

的临床应用前景和经济价值。