型可见分光光度计的操作 .pdfVIP

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型可见分光光度计的操作

可见分光光度计是一种常见的实验仪器,用于测量溶液中化合物的吸

光度。其操作一般包括以下步骤:

1.打开光度计的电源开关,待设备启动完成后保持静止。

2.调节光源强度:根据测量需要选择合适的光源强度。一般情况下,

较浓缩溶液可以使用较高的光源强度,而浓度较低的溶液则可以使用较低

的光源强度。

3.置空白试剂:在进行溶液吸光度测量之前,需要先进行一个空白试

剂的测量。取一只干净的比色皿并加入与待测溶液相同的溶剂,在UV光

下进行测量,以获得基准吸光度值。如测量可见光区域的吸光度,则使用

可见光源进行测量。

4.调整波长:根据所需测量的化合物吸收峰波长,选择合适的波长。

一般情况下,溶液中最大吸光度对应的波长是最佳选择。可以通过旋转光

栅或平行移动读数头来调整波长。

5.使用清洁试剂:在测量前,确保清洁试剂溶液没有吸收特征,即在

所选波长下吸光度接近于零。这可以通过对清洁试剂进行空白试验来确定。

6.加入试液:将测量溶液加入比色皿,注意避免任何污染。确保溶液

在比色皿中均匀分布,以获得准确的读数。同时确保比色皿不会干燥或损

坏,以免影响测量结果。

7.开始测量:在添加试剂后,立即放置比色皿于光度计读数台上。按

下“测量”或相应的按钮启动测量程序。待读数稳定后,记录吸光度值。

除了上述基本操作步骤外,还可以通过校正和质控来提高测量结果的

准确性和可重复性。质控可以使用已知浓度的标准溶液,并按照同样的方

法进行测量。校正可以通过测量标准溶液的吸光度,并与已知浓度建立标

准曲线来实现。

在测量完成后,应该关闭电源,清洁仪器并储存于合适的环境。如果

使用了高浓度物质,需要彻底清洗比色皿和读数台,避免污染影响下次实

验。

总之,使用可见分光光度计需要注意调节光源强度、置空白试剂、调

整波长、使用清洁试剂、加入试液、开始测量等操作步骤。同时还可通过

校正和质控来提高结果的准确性。正确操作可见分光光度计有助于获得可

靠的测量结果。

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