DB22T 2784-2017 水貂阿留申病诊断 ELISA法.pdfVIP

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ICS11.220

B41

备案号:59148-2018DB22

吉林省地方标准

DB22/T2784—2017

水貂阿留申病诊断ELISA法

ELISAmethodforAleutianminkdiseasediagnosis

2017-12-11发布2018-04-01实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T2784—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。

本标准起草单位:中国农业科学院特产研究所。

本标准主要起草人:张蕾、闫喜军、张海玲、胡博、刘昊、程悦宁、白雪、赵建军、朱言柱、吕爽、

薛向红、邓晓禹、史宁、鲁荣光、王洋、廉士珍。

I

DB22/T2784—2017

水貂阿留申病诊断ELISA法

1范围

本标准规定了水貂阿留申病诊断的缩略语、原理、试剂和材料、仪器和设备、操作方法和结果判定。

本标准适用于水貂和雪貂水貂阿留申病的实验室检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。

AD:水貂阿留申病(AleutianDisease)

AMDV:水貂阿留申病毒(AleutianMinkDiseaseParvovirus)

ELISA:酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay)

OD值:光密度(OpticalDensity)

TMB:四甲基乙二胺联苯胺(3,3,5,5-tetramethylbenzidine)

HRP:辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase)

DMSO:二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide)

4原理

用制备的水貂阿留申病毒抗原,包被聚苯乙烯微量板孔,使免疫反应在固相载体上进行。当备检血

清中有水貂阿留申病毒抗体存在时,则与固相载体上的抗原形成抗原-抗体复合物,再与酶标记的抗体

(抗貂免疫球蛋白)反应,最后通过测定酶作用底物催化后的产物,进行水貂阿留申病毒抗体的定性、

定量测定。

5试剂和材料

除有特殊说明外,所有试验用试剂均为分析纯。蒸馏水,符合GB/T6682中三级水的要求。

5.1包被液,取NaCO1.59g,NaHCO2.93g,用氢氧化钠溶液调pH至9.6,蒸馏水定容至1L,

233

采用0.5μm滤器过滤,存放于4℃冰箱。

5.296孔酶标板。

5.3洗涤液,pH7.4TBST缓冲液,取NaCl8.00g,KCl0.20g,Tris-base1.21g,Tween-201.00

mL,用盐酸或氢氧化钠溶液调pH至7.4,加蒸馏水定容至1L。

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DB22/T2784—2

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