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血小板聚集实验
血小板活化PAC-I,CD62P
一、血小板功能检测项目
出血时间、粘附性、聚集性、释放产物、花生四烯酸代谢产物、胞浆游离钙水平测定、凝血活性、膜糖蛋
白检测、基因多态性和突变。
常用的检测功能的方法为:血小板聚集性测定(比浊法、阻抗法、循环血小板聚集体、自发性血小板聚集),
近年来,流式细胞仪、PFA-100分析及激光衍射法检测微小聚集体也逐渐地进入临床或临床前阶段。
比浊法测定血小板聚集是应用较广泛的指标,可以用于遗传性血小板疾病诊断指标,也可以作为血栓性疾
病中评估其病理反应,指导抗栓药物的应用以及作为抗血小板药物监测之用。在比浊法的应用中,有几项
关键问题应予以注意:(1)血液采集与分离。(2)诱导剂应用:种类、浓度。(3)正常值的选定。
流式细胞仪可以检测血小板功能、代谢、尘化及受体表达,而微小聚集体的形成作为血栓形成的早期敏感
指标采用激光衍射法的测定也正在评估中,反映体内全血状态下的血小板阻抗法以及血小板内钙离子水平
的检测在临床研究中显示其意义。
二、血小板功能检测的临床应用
1、出血性疾病:分遗传性和获得性二类,采用常规的血小板聚集试验对遗传性血小板疾病即可作出初步
诊断。
2、血栓性疾病:大多数血栓性疾病均可以检测到血小板反应性增高,(这对疾病的病理过程,指导疾病治
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疗均有一定;意义,许多指标在疾病中的意义也作比较研究,一些分子标志物在反映血小板活化方面有较
高的灵敏度)。P选择素是反映血小板活化的较敏感指标,而血小板聚集性测定较为简便。最近的一些研究
也表明血小板活化指标不仪在反映血小板活化方面有意义,而且对某些疾病具有预示意义。譬如,胶原诱
导血小板聚集在妊娠25周升高,则预示先兆子痫,具有较高的灵敏性和精确性,也有采用血小板数、MPV
和聚集三项来综合预示先兆子痫。采用MPV、血小板数和P选择素,发现不稳定心绞痛和心肌梗死有差别。
这表明血小板检测在临床上足十分有用的。在血小板参与功能血栓形成的机制中,除了上述获得性原因外,
近年来的研究也证明存在遗传因素。
粘性血小板综合征为常染色体显性遗传,表现为对ADP和/或肾上腺素的血小板聚集反应增强,本征分为
三型:I型对ADP和肾上腺素聚集反应均增强,II型对肾上腺素聚集反应增强,III型对ADP聚集反应增
强。在原因不明的动脉血栓形成中,本征的发病率占21%。
血小板膜糖蛋白基因多态性与动脉血栓形成的危险之间的关系正在研究中。GPIIIa的PLA1(Leu33)→
PL2(Pro33),GPba上的三个多态性(39bp***重复变异数、Thrl45Met、-5T/C),胶原受体GPIa807C/T、
Lys505Glu的基因多态性与缺血性心脏病、脑血管病和介入疗法的关系研究,多数是在基因型与疾病关系
之间进行,虽然获得的结果尚属初步,但譬如动脉粥样硬化,心脑及周围血管血栓病,糖尿病等疾病使人
们对遗传因素与血栓形成关系有了新的认识。
3.药物监测中的应用:抗血小板药物监测通常采川
比浊法血小板聚集性测定即可,当然,采用PFA-100时,其灵敏性更高,服用ASA时其血小板诱导剂叫可
选用AA+ADP或胶原,服用抵克力得和玻立维时可选用ADP,在GPIIb/IIIa拮抗剂活疗叶,用全血血小板
聚集和流式细胞仪测得的结果—致,较比浊法灵敏,肝素治疗引起血小板减少/血栓形成综合症也叮采用聚
集法测定。
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血小板功能检测主要有以下指标:
1,p选择素测定:用ELISA法,一般实验室应该都能开展,医院检验科肯定能开展,关键是你要买到试剂
盒,有酶标仪。这个指标主要评价血小板活化程度。可行性较大。
2,血栓烷B2:也是可以用ELISA检测,难度和P选择素差不多,主要反映血栓前状态。
3,PF3:好象没有自动化仪器可以检测,所需要的试剂也很简单,白陶土和氯化钙就行了。但是首主观
影响很大。
4,血小板聚集实验:该实验需要的试剂也很简单,主要就是要有酶标仪。
5,血小板黏附实验:手主观影响大,几乎已经被淘汰了。
综上所述,有酶标仪,应该都还好做,只是操作方面你最好向做过这些实验的人请教一下。有的医院检验
科开展以上检查,可以咨询技术方面的问题。
【摘要】血小板在执行生理性止血的同时,也
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