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细胞工程知识点

第一章细胞工程

1、细胞工程：是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水

平，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或获得细胞产品的一门综合科学技术。

操作水平：细胞整体水平或细胞器水平。目的：定向改变遗传物质或获得细胞产品。理论基础：细胞全能性

发酵工程目的：定向地改造菌种,大量生产微生物菌体或代谢产物。

2、重要应用：快速繁殖；种苗脱毒；动物胚胎工程快速繁殖优良/濒危品种；运用动植物细胞培养生产活性产物/药

品（动物细胞融合单克隆抗体；植物细胞大量培养次生代谢产物）；新型动植物品种的哺育；供医学器官修

复或移植的组织工程；珍稀动植物资源的保存与保护

3、生物技术涉及：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程四个方面。

动物细胞工程涉及：细胞培养技术（组织培养、器官培养）；细胞融合技术；胚胎工程技术（核移植、胚胎分割等）；

克隆技术（单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆）。

植物细胞工程：植物组织/器官培养技术；细胞培养技术；原生质体融合与培养技术；亚细胞水平的操作技术等。

4、细胞工程与基因工程相比：前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术，后者是分子水平上的生物技术。（如克隆

多莉羊技术是细胞水平上的技术，哺育抗虫棉是分子水平上的技术。）细胞工程是基因工程的基础

第三章细胞工程实验室及实验基本操作

1、实验室涉及：基本操作室、无菌操作室、培养室、鉴定分析室、温室等。

实验室应满足清洗、无菌操作、培养基制备、贮藏和培养鉴定等多方面工作的规定。

基本操作室涉及：洗涤间、灭菌间、贮藏间、培养基配制间。无菌操作室分为：缓冲准备区、接种区。

2、消毒灭菌的方法：

物理方法：干热(烘箱)、湿热、过滤（0.25微米）、紫外灯、超声波等。

化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、双氧水、福尔马林等

（1）干热灭菌：合用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。（3）过滤除菌法：合用于一些培养基、酶液、血清等。

（2）湿热灭菌：合用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121℃维持20~30min

（4）射线灭菌：重要是运用紫外灯进行照射，适合实验室空气、操作台等，灭菌时间20-30min。

（5）火焰灼烧灭菌：用火焰灼烧达成灭菌目的，合用于接种器皿的灭菌。

（6）消毒剂：合用外植体、实验器皿、操作表面、皮肤等。

第二章(植物)细胞工程的理论基础

**1、生命特性属性涉及：新陈代谢、应激性、自我复制。离体培养细胞可展现该物种的生命特性。

2、植物组织培养的类型

按材料的类别分：愈伤组织培养（最为常见的组织培养）；细胞培养（分为悬浮细胞培养和单细胞培养）；

器官培养（胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养）；原生质体培养

按培养方法分为：固体培养；液体培养；看护培养；微室培养；包埋培养。按培养过程分：初代培养；继代培养。

3、植物细胞全能性表现强弱：

营养生长中心形成层薄壁细胞厚壁细胞(木质化细胞)特化细胞(筛管、导管细胞)；

顶端分生组织居间分生组织侧生分生组织薄壁组织(基本组织)厚角组织输导组织厚壁组织。

4、细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的，在大多数情况下，脱分化是细胞全能性的前提，再分化是

细胞全能性的最终体现。

细胞全能性实现的途径：①A循环（生命周期）②B循环（细胞周期）③C循环（组织培养周期）

**5、脱分化必须满足两个重要条件：○离体损伤刺激；○营养物质及激素的刺激；（培养温度、光照{25℃左右}、

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培养细胞的异质性等）

6、细胞分化与基因组变化最常见的变化是染色体的反复复制，而并不进行细胞分裂。

核内染色体的复制过程2种重要类型：一是核内有丝分裂，导致核内多倍体；二是大量复制染色丝，导致形成多

线染色体；以及基因重排。

7、细胞极性建立的标志：细胞的不均等分裂。植物细胞分化的基本特性：极性的建立和维管成分的产生。

影响分化的因素：激素蔗糖浓度光照温度培养基种类

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