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猪蓝耳病灭活苗生产工艺改进初步试验

蓝耳病灭活苗是我公司目前的主要产品，属于细胞苗，其生产工艺已基本稳

定可靠，但是否有进一步改进挖掘的潜力，目前国内同类产品生产厂家均对其进

行了研究，并已有相关报道，是否稳定可靠，适合抗原规模化大生产，还有待进

一步试验。为了一切从生产出发，以公司提出的“以效益优先，严控成本”为原

则，我们准备对该苗生产工艺进行摸索试验，现提出初步试验方案于下。

【试验目的】

在保证产品质量的前提下降低生产成本，减少污染环节，提高工作效率，以

投入少产出多，保质保量完成猪蓝耳苗的生产任务。

【材料】

Marc145细胞、MEM营养液、新生牛血清等由生产车间提供，以便与车间培

养细胞的生产条件保持一致。

【方法】

1．试验分组共分4组，如表1所示。

第1组：接毒方式对PRRSV增殖的影响

将传代后48h长成良好单层的4瓶Marc145细胞，弃去生长液，按5%比例

接种病毒，其中2瓶细胞37.0℃吸附1h后再加入维持液，另2瓶细胞接毒后不

吸附直接加入维持液，37.0℃继续培养，接毒48h后每隔6h观察细胞1次，细

胞病变（CPE）达70%以上时收获，反复冻融2次后混合，取样待检。

第2组：接毒量对PRRSV增殖的影响

将传代后48h长成良好单层的4瓶Marc145细胞，弃去生长液，按1%比例

接种病毒，其中2瓶细胞37.0℃吸附1h后再加入维持液，另2瓶细胞接毒后不

吸附直接加入维持液，37.0℃继续培养，细胞病变观察及收毒方式同上。

第3组：不换液对PRRSV增殖的影响

2瓶细胞在传代时加适量营养液量，待48h时长成良好单层时，按5%比例加

入病毒，然后补足营养液量。37.0℃继续培养，细胞病变观察及收毒方式同上。

2．病毒抗原毒价测定按规定进行。

表1试验设计

病毒抗原毒价

组别接毒方式数量（瓶）接毒量

TCID

50

吸附25%

第1组

不吸附25%

吸附21%

第2组

不吸附21%

1

第3组不换液不吸附，补加液体25%

3.以上试验在不影响生产的情况下，与车间相关技术人员共同进行。

【结果】

1.各组细胞接毒后的CPE情况按表2记录。

表2.不同接毒方法接毒后产生CPE观察情况

观察细胞不同时间（h）病变结果

组别

485460667278849096102108114120

吸附

组1

不吸附

吸附

组2

不吸附

组3不换液

注：（+）表示25%以内细胞出现CPE；（++）50%细胞出现CPE；（+++）75%细胞出现CPE；（-）

无CPE;(/)表示已收毒。

2.病毒含量测定结果