病毒H基因重组山羊痘病毒的构建和鉴定的开题报告 .pdfVIP

小反刍兽疫病毒H基因重组山羊痘病毒的构建和鉴

定的开题报告

一、研究背景和意义

疫苗是预防病毒感染的有效措施之一。目前，小反刍兽疫病毒（PEV）

是导致牛、羊、猪等动物反刍动物水泡病（FMD）的主要病原体。针对

PEV的疫苗开发已成为动物疫苗研究的热点之一。近年来，利用重组技术

构建病毒载体系统，是一种有效的疫苗开发方法。将目标抗原基因与安

全、高效的病毒载体组合，可在宿主细胞中表达抗原，从而诱导免疫反

应，实现保护性免疫。

目前已有研究表明，山羊痘病毒（GTPV）是一种安全、高免疫原性

的病毒载体，可用于构建大量的免疫原性蛋白表达系统。此外，由于

PEV和GTPV的宿主不同，实现两者基因的重组并不困难。因此，采用

GTPV作为载体，构建PEV病毒颗粒，成为PEV疫苗研究的一种新思路。

二、研究目的

本研究旨在利用基因重组技术，构建小反刍兽疫病毒H基因重组山

羊痘病毒，并对其表达、纯化、免疫原性及保护性进行研究。通过实验

结果，评估该重组病毒颗粒的免疫保护效果，为PEV疫苗的开发提供新

的技术路线。

三、研究内容和方法

1、设计并合成小反刍兽疫病毒H基因重组山羊痘病毒载体。

2、利用真核细胞（如293T细胞）转染法，将上述载体转染至目标

细胞内。

3、通过Westernblot等技术，检测重组载体的表达情况。

4、通过Ni-NTA柱纯化重组表达的蛋白。

5、收集纯化的样品，制备病毒颗粒。

6、对合成的重组病毒颗粒的免疫原性进行检测，包括ELISA、

Westernblot、动物免疫等方法。

7、采用动物模型评估重组病毒颗粒的免疫保护效果。

四、预期结果及分析

预期结果是成功构建小反刍兽疫病毒H基因重组山羊痘病毒，并且

表达出目标蛋白。通过对其纯化、病毒颗粒制备等步骤的优化，获得高

纯度、高效力的重组病毒颗粒。利用该病毒颗粒免疫和保护效应的检测，

并将其与其他已有的PEV疫苗进行比较，评估其实际应用前景。

五、研究意义和贡献

如果能够成功构建小反刍兽疫病毒H基因重组山羊痘病毒，获得高

效力的重组病毒颗粒，将为PEV疫苗的开发提供新思路，为牲畜的防疫

保健提供有效手段，并有望为人类通过基因重组技术开发新型疫苗提供

借鉴意义。