(完整版)仪器分析液相色谱法ppt文档 (1).ppt

简介;1．高效液相色谱法与经典液相色谱法;2．高效液相色谱法与气相色谱法;(3)气相色谱一般都在较高温度下进行的，而高效液相色谱法则经常可在室温条件下工作。

总之，高效液相色谱法是吸取了气相色谱与经典液相色谱优点，并用现代化手段加以改进，因此得到迅猛的发展。目前高效液相色谱法已被广泛应用于分析对生物学和医药上有重大意义的大分子物质，例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、高聚物、染料及药物等物质的分离和分析。

高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵，操作严格，这是它的主要缺点。;HPLC仪器;HPLC和经典LC;HPLC仪器组成;HPLC——高压输液系统;HPLC——进样装置;另外，超临界流体的物理性质和化学性质，如扩散、粘度和溶剂力等，都是密度的函数。

实现了高速化，HPLC（highperformanceliquidchromatographyorhighpressureLC)

这类键会固定相具有热稳定好，不易吸水，耐有机溶剂的优点。

试样中各组分据此得以分离。

此时的物质既不是气体也不是液体，却始终保持为流体。

硅烷化（≡Si—O－Si－C）键合固定相

CBPC——正相键合相色谱法

小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱柱。

相对分子质量十分低的样品，其挥发性好，适用于气相色谱。

Donnan膜平衡、体积排阻和分配过程

所谓超临界流体，是指既不是气体也不是液体的一些物质，它们的物理性质介于气体和液体之间。

所谓超临界流体，是指既不是气体也不是液体的一些物质，它们的物理性质介于气体和液体之间。

X+nSad=Xad+nS

HPLC中的固定相和流动相

46cm的Lichrosorb－ODS(5μ)的柱，采用梯度洗脱，可在不到0.;HPLC——检测器Detector;在液相色谱中，有两种基本类型的检测器。一类是溶质性检测器，它仅对被分离组分的物理或化学特性有响应，属于这类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等。另一类是总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应，属于这类检测器的有示差折光，电导检测器等。;HPLC——UVdetector;HPLC——FluorescenceDetector;HPLC——示差折光检测器;HPLC——其他检测器;HPLC中的固定相和流动相;Stationaryphase固定相;Mobilephase流动相;Mobilephase流动相;HPLC的主要类型和原理;主要类型;一、液固吸附色谱（LSAC）;LSAC——固定相;LSAC——流动相;二、液液分配色谱（LLPC）;LLPC——固定相;LLPC——流动相;三、化学键合相色谱法（CBPC）;CBPC——固定相的制备;CBPC——固定相的制备;CBPC——正相键合相色谱法;CBPC——反相键合相色谱法;四、尺寸排阻色谱法（SEC）;SEC——分离原理（分子筛效应）;SEC——固定相;SEC——流动相;五、亲和色谱法（AC）;六、离子色谱法（IC）;IC——分类;IC仪器的基本构成;各种液相色谱法的比较;HPLC条件和类型的选择;影响HPLC分离效果的因素;影响HPLC分离效果的因素;分离类型的选择;2．根据溶解度选择

弄清样品在水、异辛烷、苯、四氯化碳、异丙醇中的溶解度是很有用的。如果样品可溶于水井属于能离解物质，以采用离子交换色谱为佳；如样品可溶于烃类（如苯或异辛烷），则可采

用液一固吸附色谱；如样品溶解于四氯化碳，则多采用常规的分配和吸附色谱分离；如样品既溶于水又溶于异丙醇时，常用水和异丙醇的混合液作液一液分配色谱的流动相，以憎水性化合物作固定相。;3．根据分子结构选择

用红外光谱法，可预先简单地判断样品中存在什么官能团。然后，确定采用什么方法合适。例如，酸、碱化合物用离子交换色谱；脂肪族或芳香族用液一液分配色谱、液一固吸附色谱；异构体用液一固吸附色谱；同系物不同官能团及强氢键的用液一液分配色谱。;HPLC分离类型选择;HPLC的应用;2.稠环芳烃的分析;另外，超临界流体的物理性质和化学性质，如扩散、粘度和溶剂力等，都是密度的函数。

由于键合固定相非常稳定，在使用中不易流失，适用于梯度淋洗，特别适用于分离容量因子k值范围宽的样品。

如样品可溶于烃类（如苯或异辛烷），则可采

用液一固吸附色谱；

当使用水溶液时，必须限制pH在4～8范围内.

当采用软性凝胶时，溶剂也必须能溶胀凝胶。

对于折光率检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达最高灵敏度。

除CO2流体外，可作流动相的还有乙烷、戊烷、氨、氧化亚氮、二氯二氟甲烷、二乙基醚和四氢呋喃等。

中等体积的分子部分渗透