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验证性试验
实验十六紫外分光光度法测定维生素B2的含量
一、目的要求
1.掌握维生素B2含量测定的原理。
2.熟悉紫外可见分光光度法的应用。
二、仪器与试药
1.仪器
MettlerAL204电子天平752型紫外可见分光光度仪
刻度移液管规格：1mL、10mL定量滤纸（直径10cm）
容量瓶规格：100mL500mL研钵
2.试药
维生素B2原料冰醋酸氢氧化钠醋酸钠溶液蒸馏水
三、实验原理
利用维生素B2分子中具有共轭双键结构，在紫外区有吸收，测定其最大吸收波长处的吸收度即可计算其含量。
四、实验内容
维生素B2
VitaminB2
C17H20N4O6376.37
本品为7,8-二甲基-10[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-四羟基戊基]-3,10-二氢苯并蝶啶-2,4-二酮。按干燥品计算，含C17H20N4O6应为98.0%～102.0%。
【性状】本品为橙黄色结晶性粉末；微臭，味微苦；溶液易变质，在碱性溶液中或遇光变质更快速。本品在水、乙醇、二氯甲烷或乙醚中几乎不溶；在稀氢氧化钠溶液中溶解。
【鉴别】取本品约1mg，加水100mL溶解后，溶液在透射光下显淡黄绿色并有强烈的黄绿色荧光；加无机酸或碱溶液，荧光即消失。
【含量测定】避光操作。取本品约75mg，精密称定，置烧杯中，加冰醋酸1mL与水75mL，置水浴上加热溶解后，加水稀释，放冷后，移置500mL量瓶中，再加水稀释至刻度，摇匀；精密量取10mL，置100mL量瓶中，加1.4%醋酸钠溶液7mL,并用水稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在444nm的波长处测定吸光度A，按照Ｃ17H20N4O6的吸收系数为323计算，即得。
计算：维生素B2含量%=
A：供试品在444nm的波长处测得的吸收度；
D：供试品的稀释倍数；
:吸收系数;
W：维生素B2的取样量。
五、注意事项
1.避光操作。
2.振摇充分，使样品溶解完全。
3.紫外分光光度法的操作。
六、思考题
1.维生素B2的含量测定方法还有哪些？
2.的意义是什么？
七、参考文献
《中国药典》2010年版二部，786，化学工业出版社。
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