检验科微生物检测岗前培训.pdfVIP

XXXX医院

微生物检测岗前培训

第一节

微生物室环境与重要设备培训

一、清洁区

1、清洁区的物品介绍。

2、超净工作台的使用。（内排式，只保护标本不保护人，科室不设置无菌间，倒平板时用。）

二、高压洗涤室

1、高压洗涤室的使用与高压灭菌器的使用维护。

三、接种鉴定室

1、标本的采集与转运流程，消防安全门保持常闭状态，防止污染区空气对流。

2、染色区的材料介绍，显微镜的使用与维护制度。

3、生物安全柜的使用与红外灭菌器的使用。

4、接种登记与报告。

5、药敏纸片介绍

6、检验后标本与平板的处理。

第二节

操作细节培训

一、标本采集接收

1、痰用一次性专用痰盒采集。

2、分泌物与大便用康健女性拭子采集。

3、尿液用痰盒取中段尿5-10毫升。

4、血培养用专用血培养瓶。

5、无菌体液用无菌针筒抽取。

6、霍乱用碱性蛋白胨水增菌半天后转种。

二、标本的登记编号

1、先在编号本里登记，登记后再接种。

2、编号规则

以今天第一份标本为例

2019年05月16日第一份标本

051601六位，05代表05月，16代表16日，01代表今天的第一份标本，这样编号的好处是

每一份标本的标号都唯一，无论谁接手这份标本都知道接种日期。

1

三、标本的接种（以下写半块平板也可画整块，根据标本的数量和库存平板灵活处理）

1、痰液

1块血平板

半块中国蓝和半块巧克力

2、分泌物

半块血平板

半块中国蓝

3、血液、脑脊液、腹水、胸透液、胆汁等无菌体液

1块HR血平板

半块中国蓝

4、粪便

1块SS平板

1块中国蓝

5、中心静脉导管

1块血平板

6、霍乱

1块庆大平板

1块碱性平板

四、分区画线（XXXX医院都是画三区，也有的单位习惯画四区，按各人习惯来只要能分

离出单个致病菌落都可以。）

1、涂完原始区，三区画线分离单个菌落。（我们学校要求只要能分出单个菌落就算合格，

XXXX医院要求最少要分离出10个以上单个菌落才算合格）。

2

接种完置35℃，培养箱培养24小时，痰标本、尿标本、厌氧体液标本要开5%CO2环

境，第二天上午观察结果。

（1）、尿标本

尿液定量接种，1环为1uL

G+菌菌落大于10个结果为1*10^4cfu/mL，有意义。

G-菌菌落数100个结果为1*10^5cfu/mL，有意义。

尿液长3种或者3种以上菌时一般怀疑为污染菌，要求患者重送。如果结果与上一次一

致则再做鉴定。

(2)、痰标本

1)、先观察血琼脂平板，看有无

①、金葡（β溶血）有的分离鉴定。

②、肺炎链球菌，典型的酒窝状凹陷，较小菌落，灰黑色湿润边缘感，光滑周围平板一圈黑

黑的感觉（紧贴平板）。另一种菌落湿润但不形成凹陷。鉴别试验为挑一典型菌落密布

画线半块血平板做OP试验。OP阳性为肺链，阴性可不做其它实验。OP阳性再用生理

盐水做0.5麦氏比浊涂布血MH做药敏。

3

③、G阴性杆菌一般与甲链和奈瑟菌属（整个细菌可挑起）并存只存在一区打“+”，第二区

可分出的打“++”，三区也有的打“+++”。只有第一区有的看病人，如果不是危重ICU

和新生儿一般不做。只有“++”以上才做鉴定与药敏。

④、甲链和奈瑟菌属为正常菌群。

⑤、流感嗜血杆菌做为星试验鉴别。

取典型湿润菌落，画半个血平板，半个MH分区画线，半个巧克力琼脂。血平板与MH

密布画线。画完中间用25923（葡萄球菌标准菌株）画一竖。24小时后观察葡萄球菌周围。

MH有长血平板有长为副流感嗜血杆菌不处理；都不长也不处理。血平板长，MH不长，说

明是流感嗜血杆菌，用HTM平板做药