固相萃取技术课件.pptx

固相萃取技术一、固相萃取概念二、固相萃取原理五、HPLC与SPE的比较三、装置及操作程序四、溶剂的选择本节首页退出本章六、固相微萃取七、气体萃取（顶空技术）

一、固相萃取(SPE)概念本节首页退出本章SPE：SolidPhaseExtraction是一种液相色谱分离，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物与干扰化合物分离，达到分离和富集目标化合物的目的。

慢中等快淋洗液

二、固相萃取的模式及原理本节首页退出本章反相固相萃取正相固相萃取离子交换固相萃取①阴离子交换②阳离子交换

（一）、反相固相萃取本节首页退出本章流动相：极性（水溶液）或中等极性固定相：非极性。分离对象：中等到非极性物质。

本节首页退出本章分析物中的CH键+硅胶表面官能团→吸附→极性溶液中的有机分析物→保留在SPE。用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。1、反相固相萃取原理

本节首页退出本章2、常用反相固相萃取柱LC-18、LC-8：标准的单键合硅胶ENVI-18、ENVI-8：聚合键合类填料ENVI-ChromP：苯乙烯：疏水ENVI-Carb：含碳

本节首页退出本章（二）、正相固相萃取流动相：非极性、中等极性固定相：极性。分析物质：极性、中等极性、非极性

本节首页退出本章1、正相固相萃取原理保留取决于分析物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间的相互作用。用比样品本身更极性的溶剂洗脱吸附的分析物质。

本节首页退出本章①极性官能团键合硅胶LC-CN，LC-NH2，LC-Diol②极性吸附物质LC-Si，LC-Florisil，ENVI-Florisil，LC-Alumina2、常用正相固相萃取柱

知识窗流动相①②

本节首页退出本章（三）、离子交换固相萃取适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶液）。原理：静电吸引，化合物上的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团之间的吸引。分为：阴离子交换和阳离子交换。

1、阴离子（负电荷）交换本节首页退出本章LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季铵类盐+硅胶

2、阳离子交换本节首页退出本章LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基团

本节首页退出本章（四）溶剂极性的影响①目标化合物在极性/非极性溶剂中的溶解度，这主要涉及淋洗液的选择。②目标化合物有无可能离子化（可用调节pH值实现离子化）。

本节首页退出本章（四）溶剂极性的影响③目标化合物有无可能与吸附剂形成共价键。④在吸附剂上吸附点的竞争程度，关系到能否很好分离。

三、固相萃取的装置及操作程序本节首页退出本章固相萃取的装置筛板筛板筛板

本节首页退出本章1、固相萃取的装置

本节首页退出本章1、固相萃取的装置

本节首页退出本章2、操作程序（1）、活化吸附剂萃取之前要用适当的溶剂淋洗小柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。

本节首页退出本章2、操作程序（2）、上样（吸附）样品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空，加压或离心的方法使样品进入吸附剂。

本节首页退出本章2、操作程序3、洗涤（去除杂质）在样品进入吸附剂，目标化合物被吸附后，可先用较弱的溶剂将弱保留干扰化合物洗掉。

本节首页退出本章2、操作程序4、洗脱和收集再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来，加以收集。

本节首页退出本章活化吸附剂进样洗涤洗脱我来说！

四、SPE分离机制与溶剂的选择分离机制典型的弱溶剂（保留条件）典型的强溶剂（洗脱条件）反相SPE缓冲液或低浓度的甲醇或乙腈乙腈、甲醇或溶剂与水的混合物正相SPE正己烷、甲苯等二氯甲烷、甲醇等阳离子交换SPE低离子强度缓冲液(0.1mol/L)高离子强度缓冲液（＞0.1mol/L)低反离子强度高反离子强度阴性离子交换SPE低离子强度缓冲液（0.1mol/L)高离子强度缓冲液(0.1mol/L)

本节首页退出本章五、HPLC与SPE的比较HPLCSPE硬件（柱子）不锈钢柱塑料柱颗粒度(um)540颗粒形状球型(均匀）球型（不均匀）塔板数20～25，000＜100

1、柱子的比较柱接头螺帽柱管过滤片型号：C18柱管筛板固定相尖端？

N=L/H2、塔板数的比较

本节首页退出本章六、固相微萃取SPME不是将待测物质全部分离出来，通过在样品与固相涂层间的平衡来达到分离。方法：玻璃纤维浸入样品中→残留农药→扩散→吸附→平衡→取出玻璃纤维→洗脱→分析。

本节首页退出本章固相微萃取装置

本节首页退出本章固相微萃取装置关键：石英纤维上涂吸附剂原则：目标化合物是非极性时选择非极性涂层；目标化合物是极性时选择极性涂层。

使用方法

本节首页退出本章七、气体萃取（顶空技术）

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