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2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程
1.原理
聚凝胺试验(PO1ybrene)使用低离子介质(IoWionicmedium,1IM)加速IgG
型抗体与红细胞之间的反应速度。聚凝胺作为一种碱性分子可以和红细胞表
面的酸性糖分子结合,在离心力的作用下聚凝胺使红细胞相互靠近,使得已
经结合在红细胞表面的IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。然后加
入重悬液,使得聚凝胺的作用被消除。被聚凝胺凝集起来的红细胞,此时会
渐渐散开,但已经被IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会散开,以此检
测血清或血浆中存在的血型抗体。
本试验具有敏感性高及快速等优点,已应用于血型检查、抗体筛选和鉴定交
叉配血试验。聚凝胺试剂目前国内市场有售。
2.试剂与器材
2.1低离子介质(1IM)。
2.2Po1ybrene试剂。
2.32%~5%已知抗原的红细胞生理盐水悬液
2.4重悬液。
3操作
1.1主侧配血向试管中加入患者血清2滴和献血者2%~5%红细胞悬液
1滴。
次侧配血:向试管中加入献血者血清2滴和患者2%~5%红细胞悬液1滴。
1.2立即以1000Xg离心,观察结果。如果阴性则继续试验;
如果阳性,需分析原因排除干扰后继续后续试验。
1.30.6m11IMI1
加试齐」,室温放置分钟。
1.4加入2滴po1ybrene试剂,立即以IOoOxg离心1分钟,弃去试管中
液体,轻摇试管,肉眼判断红细胞凝集情况。
如果有凝集出现则继续操作。如果没有凝集出现则该试验无效。
1.5加人1滴重悬液,轻摇试管,肉眼观察结果。
4.结果判定
1分钟内凝集消失为聚凝胺试验阴性,
1分钟内凝集不消失为聚凝胺试验阳性。
5.注意事项
5.1通常情况下,使用1ISS和1IM试剂作为缩短抗原-抗体的反应时间是同
时有效的。
5.2加人重悬液后,应尽快观察结果,以免弱反应消失。
5.3肝素会中和聚凝胺的作用,应避免用肝素抗凝的血样。
5.4聚凝胺方法不适合Ke11系统抗体的检测,所以对阴性结果需进行抗
球蛋白试验,以免漏检。黄种人中Ke11系统抗体极罕见。
参考文献川尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程(第4版)[M].
北京:人民卫生出版社,2019.
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