pd-l1(28-8)实验室自建平台免疫组织化学检测与性能验证.pdf

临床与实验病理学杂志ＪＣｌｉｎＥｘｐＰａｔｈｏｌ２０１９Ｎｏｖ；３５（１１）·１３１９·

网络出版时间：２０１９－１１－１３１４：５７网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０７３．Ｒ１４５６．０１２．ｈｔｍｌ

ＰＤＬ１（２８８）实验室自建平台免疫组织化学检测与性

能验证

吴鸿雁，王婷，付尧，陈孔龄，张勤，陶钰，樊祥山

摘要：目的从ＰＤＬ１（２８８）浓缩型抗体性能验证角度出发，比较多平台的染色结果，旨在建立适宜的免疫组化染色条件，以

满足ＰＤＬ１实验室自建平台检测（ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｄｅｖｅｌｏｐｅｄｔｅｓｔ，ＬＤＴ）技术广泛运用的需求。方法设计扁桃体等多种正常组织块

“羊膜卷”对照及高、中、低表达的肿瘤组织芯片对照，验证并确认ＰＤＬ１（２８８）在ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ（１∶５０＋Ｌｉｎｋｅｒ）、ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ

（１∶５０＋Ｌｉｎｋｅｒ）、ＤＡＫＯＡＳＬ（１∶４０＋Ｌｉｎｋｅｒ）及手工（Ｍａｎｕａｌ）（１∶２０＋Ｌｉｎｋｅｒ）的染色条件，对已知ＰＤＬ１阳性的４９例非小

细胞肺癌存档蜡块进行测试，观察ＰＤＬ１（２８８）在上述四种平台染色的一致性。结果ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ、ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ、ＤＡＫＯＡＳＬ

和手工（Ｍａｎｕａｌ）ＰＤＬ１（２８８）ＬＤＴ表达例数为：当Ｃｕｔｏｆｆ值１％ＴＣ＜５０％，阳性例数分别为１２、１３、１３、１４例；Ｃｕｔｏｆｆ值ＴＣ

≤≥

５０％时，阳性例数分别为２４、２３、２３、１１例；Ｃｕｔｏｆｆ值ＴＣ＜１％时，在ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ、ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ、ＤＡＫＯＡＳＬ４８平台上检测的阴性

病例均为１３例，手工（Ｍａｎｕａｌ）染色阴性病例则为２４例。基于上述３种阈值，三种自动检测平台间的相关性分析结果显示：

ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ、ＤＡＫＯＡＳＬ４８两者秩相关系数ｒ＝１；ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ／ＤＡＫＯＡＳＬ４８与ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ的秩相关系数ｒ＝０９８；手工（Ｍａｎｕ

ａｌ）与ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ之间的秩相关系数ｒ＝０８８，手工（Ｍａｎｕａｌ）与ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ、ＤＡＫＯＡＳＬ４８之间的秩相关系数ｒ＝０８７，上述秩

相关系数差异均有统计学意义（Ｐ＜００５）。结论ＰＤＬ１（２８８）ＬＤＴ检测在ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ、ＡＳＬ４８、ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ平台上一致性

好，提示ＰＤＬ１（２８８）浓缩型抗体适用于带放大组份的检测平台，官方推荐的检测方法目前可被采纳为金标准。在可行的性

能验证完善和多组织对照条件下，可推荐ＤＡＫＯＯｍｎｉｓ、ＲｏｃｈｅＵｌｔｒａ和ＤＡＫＯＡＳＬ４８三个检测平台进行ＬＤＴ染色，手工（Ｍａｎｕ

ａｌ）染色不适合ＰＤＬ１（２８８）的检测。

关键词：肺肿瘤；非小细胞肺癌；ＰＤＬ１（２８８）浓缩液；实验室自建平台检测；免疫组织化学；性能验证

中图分类号：Ｒ７３４２文献标志码：Ａ文章编号：１００１－７３９９（２０１９）１１－１３１９－０６

ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０１９．１１．０１２

［４］

程序性死亡配体１（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｄｅａｔｈｌｉｇａｎｄ１，用，然而该试剂盒在中国并未获批上市。市面销

ＰＤＬ１）又称ＣＤ２７４，是一种参与免疫系统调节的跨售的ＡｂｃａｍＰＤＬ１（２８８）浓缩液为科研用途，临床

膜蛋白，可采用免疫组化法进行检测。在这个检测运用未经认可。目前，临床大量的ＰＤＬ１免疫组化

体系中，抗体识别并结合到一段氨基酸序列片段抗检测需求，驱动着２８８浓缩型抗体有可能作为替代

［１］品进行ＬＤＴ检测。本文着重探讨在有效的实验室

原表位，该表位特异存在于特定组织中，表位的

编号命名为克隆号。ＰＤＬ１克隆被设计成细胞内区性能验证保障下，实验室自建平台检测（ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ

和细胞外区，不同区域位点检测并与相应的检查点ｄｅｖｅｌｏｐｅｄｔｅｓｔ，ＬＤＴ）能否实现ＰＤＬ１（２８８）多平台

抑制剂一起使用［１－２］。２８