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(一)实验材料
样品:健骨肽软胶囊中试样品(批号20110102,保健品室制)
对照品:柚皮苷对照品(批号:)
绿原酸对照品()
羟基红花黄色素A()
仪器:卡玛烘板器、卡玛成像仪
试剂:乙醇、甲醇、乙醚、石油醚(30~60℃)、乙酸乙酯、甲酸等试剂,均为分析纯
(二)实验方法
2、骨碎补的鉴别
方法参照2010版《中国药典》一部239页中收载的骨碎补药材薄层鉴别方法。
供试品溶液制备:取本品内容物约1g,加甲醇30ml,加热回流1小时,放冷,滤过,
滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。
对照品溶液:取柚皮苷对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。
缺骨碎补阴性样品溶液制备:按处方比例取各药材(除骨碎补药材外)及辅料按工艺制
得阴性样品粉末,再取1g,按供试品的制备方法制得阴性样品溶液。
照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各4μl,分别点于同一硅胶G板上,以甲苯-乙
酸乙酯-甲酸-水(1∶12∶2.5∶3)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以三氯化铝
试液,置紫外光灯(365nm)下检视。分别考察了阴性干扰及点样量的方法验证,结果见图
4~5
图4健骨肽软胶囊中骨碎补的薄层鉴别图(阴性干扰)
1.柚皮苷对照品4μl2.骨碎补提取物2μl3.健骨肽供试品溶液4μl
4.健骨肽供试品溶液4μl5.缺骨碎补阴性4μl
图2健骨肽软胶囊中骨碎补的薄层鉴别图(点样量考察)
1.柚皮苷对照品4μl2.健骨肽供试品溶液2μl3.健骨肽供试品溶液4μl
4.健骨肽供试品溶液6μl5.健骨肽供试品溶液8μl
其中三批鉴别图见图3
图3健骨肽软胶囊中骨碎补的薄层鉴别图(中试三批)
1.柚皮苷对照品4μl2.健骨肽供试品溶液4μl
3.健骨肽供试品溶液4μl4.健骨肽供试品溶液4μl
骨碎补最终确定的鉴别方法
取本品内容物约1g,加甲醇30ml,加热回流1小时,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加
甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。再取柚皮苷对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶
液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(2010版《中国药典》一部附录ⅥB)试验,吸取上述
三种溶液各4μl,分别点于同一硅胶G板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(1∶12∶2.5∶3)的
上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以三氯化铝试液,置紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
3、红花的鉴别
方法一参照2010版《中国药典》一部141页中收载的红花药材薄层鉴别方法。方法二
是研究中为了除去植物油的干扰,加了石油醚萃取的方法。
供试品溶液制备:
方法一、取本品内容物约2g,加80%丙酮溶液5ml,密塞,振摇15分钟,静置,取上
清液作为供试品溶液。
方法二、取本品内容物约2g,加石油醚(60~90℃)振摇提取2次,每次10ml,弃去
石油醚(60~90℃),再用80%丙酮溶液10ml,密塞,振摇15分钟,静置,取上清液作为
供试品溶液。
对照品溶液:取羟基红花黄色素A对照品,加25%甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,
作为对照品溶液。
缺红花阴性样品溶液制备:按处方比例取各药材(除红花药材外)及辅料按工艺制得阴
性样品粉末,再取粉末2g,按供试品的制备方法制得阴性样品溶液。
照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G板上,以乙酸乙酯
-甲酸-水-甲醇(7∶2∶2∶0.4)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检
视。分别考察了阴性干扰及点样量的方法验证,结
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