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02细胞工程试题练
1.人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,该疫苗生产和抗体制备的部分流程如图。请回答:
(1)①过程需要使用_________酶。与植物细胞相比⑦过程特有的是使用_______________促进细胞融合,植物细胞融合常用的化学药物是_______________,融合前还需要用____________去除细胞壁。
(2)过程⑦的原理为_____,如果两两融合可形成的细胞类型有_________________。X细胞有_________________________________________的特点。
(3)融合后的细胞要经过两次筛选才可以大量培养,第一次筛选的目的是_______________________,第二次筛选的目的是____________________。
(4)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是_____。
(5)对该传染病疑似患者确诊时,可以用图中的_____进行特异性结合检测。
2.下图为细胞融合的简略过程示意图,请据图完成问题:
(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁,所用的酶可能是__________,由此生成的A和B称为__________;A、B到细胞C的过程中,常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是__________。
(2)若A、B是动物细胞,一般取自幼龄动物的器官、组织,然后用__________使其分散开来;A、B到C的过程中,常用的不用于植物细胞工程的方法是用__________诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为__________,其中CO2的作用是_____________________________________。此外,培养液还应进行无菌处理,通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防_______________________。
(3)若A为骨髓瘤细胞,B为经免疫的B淋巴细胞,那么D称为__________,这种细胞既能大量繁殖,又能产生__________。
(4)从A、B到细胞C的过程中,可形成__________种类型的细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。若该过程用于单克隆抗体的制备,应筛选出符合要求的D,方法是用特定的__________培养基培养,为了大规模的生产单克隆抗体,还需对D进行第二次筛选。
3.图1表示制备抗体的两个途径的模式图。图2是图1普通质粒的放大,其上有3种限制酶的酶切位点,复制原点是质粒复制不可或缺的序列。
(1)上述制备单克隆抗体过程中,①过程可使用__________促进小鼠骨髓瘤细胞与细胞A融合,融合后的细胞称为_____________(Y细胞),其细胞特点是___________
(2)培养Y细胞的培养基成分中除水、无机盐、生长因子等成分外还必须添加_________,放入______________培养箱中培养。在培养Y细胞过程中,由于出现了_____现象,因此要使用胰蛋白酶进行处理。
(3)由图1可知,也可以通过基因工程制备特异性抗体,下列有关叙述正确的有_____
A.制备抗体2的途径中,目的基因是V1基因
B.图示获取目的基因的方法是化学方法人工合成
C.获得Y细胞的过程不需要筛选
D.抗体1和抗体2的结构不完全相同
(4)综合考虑基因工程的步骤,若只能选择一种限制酶切割质粒,写出选择PstI的理由_____。
4.CRISPRCas系统是在细胞进化过程中形成的一种防御机制。Cas蛋白能截取噬菌体的DNA片段,并将其插入到细菌自身的CPISPR基因中,整合有噬菌体DNA片段的CRISPR基因经转录产生RNA,此RNA与Cas蛋白共同构成CRISPR/Cas复合物,在此RNA引导下,该复合物能定点切割对应的噬菌休DNA片段。科学家通过改造此系统,产生了CRISPR/Cas9基因编辑技术,可以实现对DNA的定点切割,工作原理如下图所示。2019年上海科研团队通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中的生物节律核心基因BMAL1,再利用体细胞克隆技术,获得了5只BMAL1基因敲除的克隆猴。这是国际上首次成功构建出的一批遗传背景一致的生物节律紊乱的猕猴模型。请回答下列问题:
(1)CRISPR/Cas系统中的Cas蛋白合成的场所是_____________,该系统需要对特定的DNA序列识别并切割,其功能类似于基因工程工具酶中的________________,作用的化学键为_____________,推测该系统在细菌体内的生理意义是___________________________________。
(2)由于Cas9蛋白没有特异性,用CRISPR
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