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02细胞工程试题练
1.人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,该疫苗生产和抗体制备的部分流程如图。请回答:
(1)①过程需要使用_________酶。与植物细胞相比⑦过程特有的是使用_______________促进细胞融合,植物细胞融合常用的化学药物是_______________,融合前还需要用____________去除细胞壁。
(2)过程⑦的原理为_____,如果两两融合可形成的细胞类型有_________________。X细胞有_________________________________________的特点。
(3)融合后的细胞要经过两次筛选才可以大量培养,第一次筛选的目的是_______________________,第二次筛选的目的是____________________。
(4)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是_____。
(5)对该传染病疑似患者确诊时,可以用图中的_____进行特异性结合检测。
【答案】逆转录灭活的病毒聚乙二醇(PEG)纤维素酶和果胶酶细胞膜的流动性效应B细胞与效应B细胞;骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞;效应B细胞与骨髓瘤细胞(杂交瘤细胞)既能无限增值,又可以产生单一抗体第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞第二次筛选的目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高,并可大量制备抗A蛋白的单克隆抗体
【分析】
由图可知,①表示反转录,③表示构建基因表达载体,④表示将目的基因导入受体细胞,,⑥表示分裂分化,⑦表示动物细胞融合,⑧表示获得单克隆抗体。
【详解】
(1)①表示反转录,需要用到逆转录酶处理。⑦表示动物细胞融合,动植物细胞融合均可以用物理或化学方法处理,动物细胞融合特有的是用灭活的病毒处理诱导细胞融合。植物细胞融合常用化学药物PEG处理,融合前需要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁。
(2)⑦表示动物细胞融合,原理是细胞膜的流动性。两两融合的细胞有效应B细胞与效应B细胞;骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞;效应B细胞与骨髓瘤细胞。X细胞即杂交瘤细胞,既能无限增殖,又能产生单一抗体。
(3)融合后的细胞需要用选择培养基进行筛选,筛选出杂交瘤细胞;第二次是用专一抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
(4)单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高,可大量制备。
(5)某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,故可以用抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性检测。
【点睛】
注意杂交瘤细胞和单克隆抗体的特点;注意区分第一次筛选和第二次筛选的作用。
2.下图为细胞融合的简略过程示意图,请据图完成问题:
(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁,所用的酶可能是__________,由此生成的A和B称为__________;A、B到细胞C的过程中,常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是__________。
(2)若A、B是动物细胞,一般取自幼龄动物的器官、组织,然后用__________使其分散开来;A、B到C的过程中,常用的不用于植物细胞工程的方法是用__________诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为__________,其中CO2的作用是_____________________________________。此外,培养液还应进行无菌处理,通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防_______________________。
(3)若A为骨髓瘤细胞,B为经免疫的B淋巴细胞,那么D称为__________,这种细胞既能大量繁殖,又能产生__________。
(4)从A、B到细胞C的过程中,可形成__________种类型的细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。若该过程用于单克隆抗体的制备,应筛选出符合要求的D,方法是用特定的__________培养基培养,为了大规模的生产单克隆抗体,还需对D进行第二次筛选。
【答案】纤维素酶和果胶酶原生质体杂种细胞产生新的细胞壁胰蛋白酶灭活的病毒95%的空气加5%的CO2维持培养液的PH培养过程中的污染杂交瘤细胞专一的抗体3选择性
【分析】
分析题图,图为细胞融合的过程,A、B为植物细胞或动物细胞,C为正在融合的细胞,D为杂种细胞。杂种细胞含有A、B两个细胞的遗传物质。动物细胞培养的条件包括无菌和无毒、营养、适宜的温度和pH、气体环境(95%的空气加5%的CO2)。单克隆抗体制备过程:已免疫的B细胞
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