猪链球菌病诊断 (2).ppt

1040bp100bp250bp500bp750bp1000bp2000bpM123M:DL-Marker20001:ZY05719(gapdh)2:HA9801(gapdh)3:空白对照gapdh第31页,共34页，星期六，2024年，5月图8orf2PCR检测结果1marker;2~4,7~13PCRproductsofswineStreptococcus,2HA9801;5~6negativecontrol第32页,共34页，星期六，2024年，5月图11PCR检测猪链球菌2型cps21.H2O;2.SH0033;3.35246;4.ZY05722;5.ZG05464;6.GH05458;7.HA9802;.8.ZY05719;9.HA9801;10.YJ05465;11.JDZ05802-1;12.JR05730;13.ZY05721;14.11611;15.CHZ05806;16.260;M.MarkerDL2000.bp387M161514131211109876543211002502000750第33页,共34页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第34页,共34页，星期六，2024年，5月关于猪链球菌病诊断(2)病原：1猪链球菌2型（Streptococcussuis2）2马链球菌兽疫亚种（Streptococcusequisubspzooepidemicus)，旧称兽疫链球菌3D、E、L、S群链球菌(Lancefield)兰氏血清学分群，链球菌分为20个血清群（A、B、C.....V,I、J除外）第2页,共34页，星期六，2024年，5月一、病原分离1采样活猪：采样用灭菌棉拭子擦拭扁桃体病死猪：扁桃体、肺、肝、血液，有脑炎症状取脑组织，关节炎可取关节囊液第3页,共34页，星期六，2024年，5月2分离培养（1）培养基：THB培养基、绵羊血或马血平板（2）培养条件：需氧兼性厌氧、37℃、pH7.2猪链球菌2性营养要求比马链球菌兽疫亚种低，后者需加3-5%的犊牛血清第4页,共34页，星期六，2024年，5月二、临床诊断主要表现为败血症、化脓性淋巴结炎、脑膜炎、心内膜炎、关节炎等。但不同链球菌病原引起的症状类似，故该诊断不能用于确诊。第5页,共34页，星期六，2024年，5月关节炎症状第6页,共34页，星期六，2024年，5月败血症第7页,共34页，星期六，2024年，5月1染色镜检猪链球菌2型：革兰氏染色阳性、菌体呈圆形或椭圆形，直径小于2.0μm，一般呈短链或成双排列，革兰氏染色阳性，菌体表面能形成荚膜。二、微生物学诊断第8页,共34页，星期六，2024年，5月马链球菌兽疫亚种：革兰氏阳性球菌，直径0.5~1um，液体培养基中呈长链，菌体表面能形成荚膜。营养要求较高，在5%犊牛血清生长良好。根据类M蛋白抗原性的差异，该菌至少有15个血清型。第9页,共34页，星期六，2024年，5月马链球菌兽疫亚种猪链球菌2型菌（α溶血）第10页,共34页，星期六，2024年，5月图2猪链球菌2型(ZY05719)?第11页,共34页，星期六，2024年，5月ATCC35246株第12页,共34页，星期六，2024年，5月2培养特性猪链球菌2型：菌落形态血平板上呈灰白色小菌落，粘稠，2型在绵羊血平板上呈α溶血，马血平板则呈β溶血。第13页,共34页，星期六，2024年，5月马链球菌兽疫亚种：在血清肉汤培养基中培养该菌，开始时有轻度混浊，继而变清，于管底形成沉淀。于5％绵羊血琼脂（THA）培养基上培养24h，大部分菌株形成3～4mm的粘液样大菌落，产生明显的β溶血。小部分呈非粘液样菌落，大小约1mm左右。第14页,共34页，星期六，2024年，5月3生化鉴定猪链球菌2型：发酵乳糖、海藻糖、水扬苷，部分菌株发酵棉实糖、菊糖；不发酵甘露醇、山梨醇第15页,共34页，星期六，2024年，5月马链球菌兽疫亚种：能水解精氨酸，发酵乳糖、水扬苷、山梨醇产酸。不能发酵菊