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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN105445477A
(43)申请公布日2016.03.30
(21)申请号CN201510794008.4
(22)申请日2015.11.18
(71)申请人济南大学
地址250022山东省济南市济微路106号
(72)发明人任祥魏琴庞雪辉马洪敏吴丹张勇孙旭范大伟
(74)专利代理机构
代理人
(51)Int.CI
G01N33/74
G01N27/327
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境
雌激素传感器的制备方法及应用
(57)摘要
本发明涉及氮掺杂石墨烯标记的环
境雌激素传感器的制备方法及应用,属于
新型功能材料、生物传感检测技术领域。
该传感器以AuAg异质合金为基底材料,
氮掺杂石墨烯为检测抗体修饰材料,采用
层层纳米自组装技术,构建了一个夹心型
免疫传感器。利用AuAg异质合金与氮掺
杂石墨烯的协同催化作用,显著提高了环
境雌激素传感器的灵敏度、扩展了线性范
围,对环境雌激素的检测分析具有重要的
意义。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
权利要求说明书
1.一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法及应用,其特征在于,
包括以下步骤:
(1)将直径为4mm的玻碳电极用Alsub2/subOsub3/sub抛光粉打磨,超
纯水清洗干净;将3~8μL、0.5~2mg/mLAuAg异质合金液滴加到电极表面,室温下
晾干成膜;
(2)依次滴加6μL环境雌激素抗体,6μL、质量分数为0.5%~2.5%的牛血清白蛋
白BSA溶液于电极表面,封闭电极表面上非特异性活性位点,超纯水冲洗,4℃冰
箱中晾干;
(3)滴加6μL、0.003~5ng/mL的一系列不同浓度的环境雌激素抗原标准溶液至电
极表面,超纯水冲洗,4℃冰箱中晾干;
(4)滴加6μL氮掺杂石墨烯与环境雌激素抗体孵化物Ab-N-GS于电极表面,超纯
水冲洗,4℃冰箱中晾干。
2.如权利要求1所述的一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法
及应用,所述的AuAg异质合金,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将0.001~1mL、0.05~0.1mol/L氯金酸,0.01mL、0.05~0.5mol/L硝酸银和
0.1~5mL、0.1~3.5mol/L的聚二烯丙基二甲基铵盐酸盐PDDA加入到20~200mL的
乙二醇溶液中,混合均匀;
(2)将混合溶液在60~185℃下反应20~100h,将所得固体用超纯水洗涤、在
10000~15000r/min下离心3次,35~55℃下在真空干燥箱干燥2~24h,得到AuAg
异质合金。
3.如权利要求1所述的一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法
及应用,所述的氮掺杂石墨烯与环境雌激素抗体孵化物Ab-N-GS,其特征在于,
包括以下步骤:
(1)称取20~100mg的氧化石墨烯,分散于30~100mL的超纯水中,并加入
50~300mL的N,N-二甲基甲酰胺DMF,充分摇匀,超声0.5~5h;
(2)将混合液在130~160℃下反应0.5~5h,反应结束后,8000~10000r/min下离心
10~30min,所得固体在40~60℃下,于真空干燥箱干燥12~48h得到氮掺杂石墨烯
N-GS;
(3)将0.1~0.5gN-GS加入到5~15mL无水乙醇中,加入0.1~3mL3-氨丙基三乙氧
基硅烷,50~85℃回流0.5~5h,将所得固体在8000~10000r/min下离心10~30min,
所得固体在40~60℃下,于真空干燥箱干燥12~24h,制得氨基化N-GS;
(4)将所得氨基化N-
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