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大肠杆菌对不同表面修饰的石墨烯量子点胁迫响应机制研究

中文摘要

石墨烯量子点（GrapheneQuantumDots，GQDs）是零维碳基纳米材料，由于其具

有良好的光稳定性、生物相容性、高可调光致发光（PL）、水和有机介质溶解度等特性，

GQDs在光催化、光电、电化学和生物医药等领域得到了广泛应用。但是GQDs的大量

应用不可避免地会给生态环境带来一定的影响，尤其是对生态系统中作为分解者的微生

物影响，而微生物对于GQDs胁迫的适应也应是一个重要的研究方面。本研究以不同表

面修饰的GQDs（G-NH、G-Cl、G-COOH）为胁迫因子，以大肠杆菌（E.coli）为胁迫

2

对象，系统地研究了E.coli对不同表面修饰的GQDs持续胁迫后的生理生化指标的响应，

并研究不同表面修饰的GQDs影响下E.coli的基因组、转录组变化，通过对差异基因的

功能分类和分析，结合E.coli的生理生化相应指标，探讨E.coli对不同表面修饰GQDs

胁迫的响应机理，为深入研究微生物生态系统对抗GQDs胁迫的机理提供理论依据。主

要研究内容如下：

（1）不同浓度的不同表面修饰GQDs持续胁迫E.coli后对细菌的生理影响及抗性

获得：本研究以不同表面修饰的GQDs为胁迫因子，以E.coli为胁迫对象，对E.coli进

行胁迫，结果表明在900μg/mlG-NH、600μg/mlG-Cl、900μg/mlG-COOH浓度下，

2

细菌数量明显减少（P0.05）；对E.coli使用不致死浓度的不同表面修饰GQDs持续

胁迫，使E.coli能够在更高浓度的不同表面修饰的GQDs环境下生存。分析持续胁迫后

细菌生理生态指标的变化，以反映不同表面修饰的GQDs对E.coli生理生态的影响。结

果表明，在一定浓度持续胁迫下，E.coli能在900μg/mlG-NH、900mg/mlG-Cl、900μg/ml

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G-COOH浓度环境下存活，且存活率不断升高。证明E.coli获得了对不同表面修饰的

GQDs的抗性。

（2）E.coli在不同表面修饰的GQDs胁迫下基因组水平的响应：本研究对已获得抗

性的E.coli进行了全基因组测序并进行了基因组学分析。在基因组水平上研究了不同表

面修饰的GQDs对E.coli基因的影响，探究了不同表面修饰的GQDs对E.coli基因组水

I

平的毒性机理及E.coli获得抗性的机制。结果表明：在G-NH处理组中，E.coli获得了

2

基因copA（CopA蛋白）和基因fxsA（FxsA蛋白）；在G-Cl处理组中，E.coli获得了

基因copA（CopA蛋白）、基因fxsA（FxsA蛋白）和基因cbeA（抗毒素YeeU）;在G-COOH

处理组中，出现基因copA（CopA蛋白）和基因fxsA（FxsA蛋白）。在G-NH、G-Cl

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和G-COOH胁迫下，E.coli通过基因copA（CopA蛋白）有效从细胞中排出G-NH、

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G-Cl和G-COOH，维持了细胞稳态。FxsA与PifA存在相互作用，PifA存在，会使FxsA

过表达，而FxsA蛋白的过度表达，补偿了G-NH、G-Cl和G-COOH对E.coli细胞膜的

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损伤，维持了E.coli正常生物形态及生物活性。在G-Cl处理组中出现的基因cbeA（抗

毒素YeeU）与E.coli细胞骨架蛋白质相互作用，对细胞骨架起正向调节作用，加固了

E.coli防御系统，G-NH和G-COOH