高三生物一轮复习：第36讲--基因工程.pptx

考点一基因工程的概念及基本操作工具

考点二基因工程的基本操作程序

考点三基因工程的应用与蛋白质工程

考点四DNA的粗提取与鉴定

经典真题?高考预测

教师备用习题;1.基因工程的诞生(Ⅰ)。

2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)

3.基因工程的应用(Ⅱ)

4.蛋白质工程(Ⅰ)

5.实验:DNA的粗提取与鉴定(实验与探究能力)。;考点一

基因工程的概念及基本操作工具;一、基因工程概念的理解;二、基因工程的操作工具

1.限制性核酸内切酶(简称限制酶)

(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)作用:识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)结果:产生。;2.DNA连接酶;3.;[解析]限制性核酸内切酶能将DNA切成两个或多个片段,DNA水解酶能将DNA水解。;【易错辨析】

(4)DNA连接酶能将两碱基通过氢键连接起来。 ()

(5)质粒通常采用抗生素合成基因作为标记基因。 ();;;;;1.与DNA有关的酶的比较;（续表）;2.限制酶的特点与使用

(1)限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点上进行切割;限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。

(2)在获取目的基因和切割载体时通常用同一种限制酶,以获得相同的黏性末端。但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同,在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。;2.限制酶的特点与使用

(3)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”,可用不同的限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体,使目的基因两侧及载体上各自具有两个不同的黏性末端。;1.[2020·四川攀枝花市二模]根据与基因工程有关的知识,回答下列问题:

(1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型

有和。;1.[2020·四川攀枝花市二模]根据与基因工程有关的知识,回答下列问题:

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段为AATTC……GG……GTTAA,为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切???外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是。;1.[2020·四川攀枝花市二模]根据与基因工程有关的知识,回答下列问题:

(3)根据酶的来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,

即DNA连接酶和DNA连接酶。;1.[2020·四川攀枝花市二模]根据与基因工程有关的知识,回答下列问题:

(4)基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。;1.[2020·四川攀枝花市二模]根据与基因工程有关的知识,回答下列问题:

(5)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是。;2.[2021·云南师大附中高三月考]图中甲、乙分别表示质粒和含目的基因的DNA片段。几种可供选择使用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoRⅠ:—G↓AATTC—;BamHⅠ:—G↓GATCC—;BclⅠ:—T↓GATCA—;Sau3AⅠ:—↓GATC-。;回答下列问题:

(1)限制酶的作用是识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开。题中可供使用的限制酶,切割相应DNA片段后能产生黏性末端的有

。;回答下列问题:

(2)经限制酶Sau3AⅠ切割后得到的DNA片段可以与上述其余限制酶中

的(填限制酶名称)切割后得到的DNA片段连接,理由是。图甲质粒经Sau3AⅠ完全切割后可得到种DNA片段。?;;回答下列问题:

(3)为防止限制酶切割后的DNA片段自身环化,在基因工程中通常使用两种切割后产生不同黏性末端的限制酶切割同一DNA分子。由此分析,图甲应当使用(填限制酶名称)进行切割,图乙应当使用(填限制酶名称)进行切割。?;回答下列问题