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- 2024-12-15 发布于广西
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学必求其心得,业必贵于专精
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第2节基因工程及其应用
知识梳理
1。基因工程的原理
(1)概念:基因工程又称基因拼接技术或DNA重组技术.通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰,然后放到受体细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工,需要有专门的工具。基因的剪刀、基因的针线和基因的运载体是基因工程最基本的工具。
(2)基因操作的工具
①基因的“剪刀-—指的是限制性核酸内切酶(简称限制酶)。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。
②基因的“针线——指的是DNA连接酶,它的作用是催化脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA骨架上的缺口,形成磷酸二酯键.
③基因的运载体——将外源基因送入受体细胞,需要专门的运输工具即运载体。目前常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等.
(3)基因操作的基本步骤
第一步:提取目的基因。有从供体细胞的DNA中直接分离基因和人工合成基因两种途径。
第二步:目的基因与运载体结合。先用限制性内切酶分别切割质粒和目的基因,再用DNA连接酶连接二者,使切下的目的基因片段插入质粒的切口处,形成重组DNA。
第三步:将目的基因导入受体细胞.用人工的方法(利用氯化钙处理细菌)使体外重组的DNA分子转移
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