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血清促甲状腺激素（TSH）诊断试剂盒

时间分辨免疫荧光分析法

标准操作规程

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医院：血清促甲状腺激素（TSH）诊版本：

断试剂盒

科：时间分辨免疫荧光分析法执行日期：

室：标准操作规程共3页第1页

1.原理

本试剂盒采用双抗体夹心一步法。抗人TSH单抗包被于96孔荧免板，校准品或样品中

的TSH与包被单抗及铕离子(Eu3+)标记的单抗于微孔内表面发生免疫反应，通过洗涤分离微

3+

孔表面的夹心免疫复合物与游离的标记单抗。微孔表面免疫复合物中的Eu被荧光增强液

解离后形成稳定的荧光配合物，荧光强度与校准品或样品中的TSH浓度呈正比例，通过校

准曲线可得出样品中TSH浓度。

2.样本处理

使用血清或用肝素抗凝的血浆。不能使用以EDTA或柠檬酸盐作抗凝剂的血浆样本。2～

8℃条件下样本可保存二周，–20℃可保存更长时间。避免样本反复冻融。

3.试剂

本科室使用苏州新波生物技术有限公司血清促甲状腺激素（TSH）时间分辨荧

光免疫法诊断试剂盒，试剂盒主要组分如下：

a.包被有抗人TSH单抗的96孔板：一块（12孔×8）

b.铕（Eu3+）标记的抗TSH单抗（铕标记）：一瓶，1.5ml

c.校准品（A、B、C、D、E、F）：一套，1.5ml/瓶

d.浓缩洗液：一瓶,40ml

e.荧光增强液：一瓶,30ml

f.分析缓冲液：一瓶,40ml

g.吸头：20支

h.说明书：一份

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4.仪器（用户自备）

4.1时间分辨荧光分析仪；

4.2微孔洗涤机；

4.3微孔振荡器；

5.操作步骤

5.1.试剂的准备

（1）洗涤液：将40ml浓缩洗液和960ml蒸馏水在干净的洗液瓶中混合，作为工作洗涤

液。

（2）将分析缓冲液、校准品、待测样品和所需数量的微孔反应条平衡至室温（20～25℃）。

（3）使用前一小时内，按照需要用量以分析缓冲液稀释铕标记（1:20）（详见操作流程图）。

5.2．吸取100μl校准品和待测样品，加入反应板微孔内。

5.3．在各微孔内加入100μl已稀释的铕标记溶液，在室温（20～25℃）下于慢档振板1小时。

5.4．洗板6次。将板条在洁净无尘的吸水纸上拍干。

5.5．在每个微孔内加入200μl增强液，于慢档振板5分钟。

5.6.确定微孔反应板已固定在时间分辨荧光测定仪上，开始检测。

6.计算

结果测定：用新波公司ANYTEST2000时间分辨荧光测定仪或WALLAC公司时间分辨荧光

测定仪（1230、1234、1420,等）测量

7．临床意义

TSH是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，分子量约28000D，由α、β两个亚单位组

成。血清中只有整分子TSH具有生物活性。正常情况下，下丘脑分泌的TSH释放激素（TRH）

和血清中的甲状腺激素分别对垂体前叶TSH的分泌起刺激和负反馈抑制作用，从而使血清

TSH维持在正常