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有助于润肠通便检验方法

1动物实验

1.1小肠运动实验

1.1.1原理

经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠小肠蠕动抑制模型，计算一定时间内小肠的墨汁推进率，来判断模型小鼠胃肠蠕动功能。

1.1.2仪器和材料

1.1.2.1仪器和试剂

手术剪、眼科镊、直尺、注射器、天平、活性炭粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛哌丁胺。1.1.2.2试剂配制

1.1.2.2.1墨汁的配制：准确称取阿拉伯树胶100g，加水800mL，煮沸至溶液透明，称取活性碳（粉状）50g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液凉后加水定容到1000mL，于冰箱中4℃保存，用前摇匀。

1.1.2.2.2复方地芬诺酯混悬液的配制：浓度为0.025%。

复方地芬诺酯片，每片含复方地芬诺酯2.5mg，取复方地芬诺酯片25mg（10片），用研钵研碎呈粉末后加水至100mL，临用前配制。

1.1.2.2.3洛哌丁胺溶液的配制

洛哌丁胺剂量为2－4mg/kgBW。依据洛哌丁胺的实用剂量取用，按实验所需浓度配制，可加热待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。

1.1.3实验方法

1.1.3.1实验动物

选用成年雄性小鼠，体重18－22g，每组10－15只。

1.1.3.2剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给蒸馏水。受试样品给予时间7天，必要时可延长至15天。

1.1.3.3实验步骤

1.1.3.3.1模型的建立

给受试样品7天后，各组小鼠禁食不禁水16小时。

模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯（5mg/kgBW）或洛哌丁胺（2~4mg/kgBW），空白对照组给蒸馏水。

1.1.3.3.2指标测定的方法

给复方地芬诺酯或洛哌丁胺后0.5小时后，剂量组分别给予含相应受试样品的墨汁（含5%的活性炭粉、10%阿拉伯树胶），阴性和模型对照组给墨汁灌胃。

25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下

式计算墨汁推进率：

墨汁推进率(%)=

1.1.4数据处理及结果判定

墨汁推进长度（cm）

小肠总长度（cm）

×100%

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墨汁推进率需进行数据转换，X＝Sin-1p，式中P为墨汁推进率，用小数表示。在进行方差分析时，

需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

在模型成立的前提下，受试样品组小鼠的墨汁推进率显著高于模型对照组的墨汁推进率时，可判定该项实验结果阳性。

1.2排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定

1.2.1原理

经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，测定小鼠的首粒排黑便排便时间、5或6小时内排便粒数和排便重量，来反映模型小鼠的排便情况。

1.2.2仪器和材料

1.2.2.1仪器和试剂

眼科镊、注射器、分析天平、活性炭粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯、洛哌丁胺。

1.2.2.2试剂配制

1.2.2.2.1墨汁的配制：同小肠运动实验。

1.2.2.2.2复方地芬诺酯混悬液的配制：浓度为0.05%。复方地芬诺酯片，每片含2.5mg复方地芬诺酯。

取复方地芬诺酯片50mg（20片），用研钵研碎后加蒸馏水至100mL，临用前配制。

1.1.2.2.3洛哌丁胺溶液的配制：

洛哌丁胺剂量为4－7mg/kgBW。依据洛哌丁胺的实用剂量取用，按实验所需浓度配制，可加热待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。

1.2.3实验方法

1.2.3.1实验动物

选用成年雄性小鼠，体重18－22g，每组10－15只。

1.2.3.2剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给蒸馏水。受试样品给