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实验食品中磷的测定;一、测定意义;构成血液的磷酸盐缓冲体系
细胞内的磷酸盐参与许多酶促反应
构成核苷酸辅酶类的辅酶
细胞膜磷脂在构成生物膜结构、维持膜的功能方面起着很重要的作用
通过化学修饰起代谢调控作用
;二、原理;2、分光光度法的测定原理
食物中的有机物经酸氧化,使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸镀。此化合物被对苯二酚、亚硫酸钠还原成蓝色化合物——钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸收光值,以定量分析磷含量。;三、适用范围;四、仪器与试剂;2、主要试剂
硫酸:相对密度1.84。
高氯酸--硝酸消化液;1+4混合液。
15%硫酸溶液:取15mL硫酸徐徐加入到80ml,水中混匀。冷却后用水稀释至100mL。
对苯二酚溶液:称取0.5g对苯二酚于100ml水中,使其溶解,并加人一滴浓硫酸(减缓氧化作用)。
;钼酸铵溶液:称取O.5g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]用15%硫酸稀释至100ml
亚硫酸钠溶液:称取20g无水亚硫酸钠于100m1.水中,使其溶解。此溶液需于实验前临时配制,否则可使钼蓝溶液发生混浊。;磷标准储备液(100ug/mL):精确称取在105摄氏度下干燥的磷酸二氢钾(优级纯)O.4394g,置于1000mI。容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度。此溶液每毫升含100ug磷。;磷标准使用液(10ug/mL):准确吸取10mL磷标准储备液,置于100ml,容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。此溶液每毫升含磷10ug。;五、实验步骤;冷却,转移至100mL容量瓶中,用水多次洗涤凯氏烧瓶,洗液合并倒入容量瓶内,加水至刻度,混匀。此溶液为试样测定液。
取与消化试样同量的硫酸、高氯酸一硝酸消化液,按同一方法做空白溶液。;2、标准曲线的绘制;3、样品测定测定;六、数据处理;2、标准曲线图;4、计算结果;七、注意事项;谢谢观看;谢谢
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