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生理学试验手册
EXPERIMENTMANUALFORPHYSIOLOGY
专业及班级:
学号:
姓名:
组别:
天津医科大学临床医学院生理学试验室
试验一标本制备及BL-410生物机能试验系统的使用
Experiment1PreparationofspecimensandtheuseofBL-410
biologicalfunctionofexperimentalsystem
同组人姓名(thenameofthestudentsinthesamegroup)
日期(date):年月日
【试验目的】
掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术,为此后有关的神经肌肉试验打下基础;熟悉BL-410生物机能试验系统的使用。
【试验原理】
蛙或两栖类动物的某些基本生命活动及生理功能与温血动物近似,并且其离体组织需要的生活条件非常简朴,易于控制和掌握。因此在生理学试验中,坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象,常常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。
【试验器材和药物】
蛙类手术器械一套(金属探针1根,粗剪刀、眼科剪刀各1把,圆头镊子、眼科镊子各1把,玻璃分针2根),蛙板和玻璃板各1块,培养皿,滴管,废物缸、锌铜弓,丝线,棉花;任氏液。
【试验对象】蟾蜍或蛙。
【试验措施和环节】
1.破坏脑和脊髓(常用的有三种措施)
(1)俯式捣毁法:是最常用的措施。以左手持蟾蜍,将其腹面朝向手心,前肢
夹在食指和中指之间固定,后肢夹在无名指和小指之间固定,并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角;然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划,可触及一凹陷处即为枕骨大孔。将探针从枕骨大孔垂直刺入1~1.5mm,再向前刺入颅腔,左右搅动(可感觉到探针与颅骨壁的碰击),破坏脑组织;再将探针退回至进针处,但不拔出而是转向后方刺入椎管,破坏脊髓。
(2)仰式捣毁法:将蟾蜍仰卧于蛙板上,拉开下颌,右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔,用探针在颅腔内向四面捣毁脑组织,然后将探针退至粘膜下,针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。
(3)横断脊柱后捣毁法:左手持蟾蜍,右手持粗剪刀,在两腋窝稍下横断脊柱,然后在脊柱呈白色的脊髓断面处,向上插入探针破坏脑,再向下插入探针破坏脊髓。
以上措施破坏脑和脊髓成功后,蟾蜍出现四肢(尤其是后肢)瘫软,并常有尿失禁现象。
Schematicsforhandingoftoad
2.剪去躯干上部及内脏用粗剪刀在两侧腋部稍下(或在骶骼关节以上1.5~2cm处)剪断脊柱,用左手握住蟾蜍后肢,拇指按压骶骨,使蟾蜍头部及内脏自然下垂;避开腰骶神经丛后,右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁,在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉,弃入废物缸内。
3.剥皮左手持大镊子夹住脊柱断端(小心勿伤神经),右手捏住脊柱断端的皮肤边缘,逐渐向下剥去所有后肢皮肤。将剥好的标本放置在盛有任氏液的培养皿
中,或置于洁净的玻璃板上,滴加任氏液备用。然后洗手并清洗用过的手术器械。
4.分离左右腿用圆头镊子夹住脊柱并提起,避开坐骨神经,用粗剪刀剪去向上突出的骶骨,沿脊柱正中线将脊柱从上向下提成两半,再从耻骨联合中央剪开(注意:剪开时应防止剪刀走“S”形,以保证坐骨神经的完整),将已分离的两腿浸入任氏液备用。亦可在游离大腿部位的坐骨神经后再分离两腿。
5.游离坐骨神经取蟾蜍腿一条,用玻璃分针在大腿背面内侧沿坐骨神经沟(股二头肌与半膜肌之间)分离肌肉,暴露坐骨神经。向上将梨状肌及其附近的结缔组织剪断,然后用玻璃分针沿脊柱自上而下轻柔游离坐骨神经腹腔部(坐骨神经呈亮白色束状),用眼科剪刀剪断神经的所有分支,在近脊柱处穿线结扎,从脊柱根部将坐骨神经剪断。也可以不结扎、不剪断神经,而保留一小块与神经相连的脊柱(约0.5cm×0.5cm左右),供握持神经用。
6.游离股骨将游离的坐骨神经轻轻搭在腓肠肌上,切断膝关节周围的大腿部肌肉,把股骨刮洁净,然后剪去股骨小头并保留余下的股骨(约1~1.5cm),以便在固定神经肌肉标本时使用。
7.完毕标本用眼科镊子(或小剪刀)在跟健下方穿一洞,向上游离腓肠肌至膝关节处。穿线结扎腓肠肌跟健,左手提线,在结扎线远端剪断跟健。将膝关节如下的小腿其
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