生物指示物选择、应用与缩短培养时间的验证.pdfVIP

环氧乙烷灭菌生物指示物选择、应用与

缩短培养时间（RIT）的验证

生物指示物是指一类特定的微生物和载体结合，经过特定方法制备的生物制品，这

些特定微生物比普通微生物对相应的灭菌模式具有更强的耐受性，用于指示微生物的死

亡情况，以反映灭菌效果。

由于生物指示物可以真实可靠的反映灭菌过程中有关时间、温度和湿度等多个因素

的关系，因此广泛应用于环氧乙烷等灭菌工艺的验证与日常监控。验证时应确认所选择

的生物指示物的抗力的适宜性，否则将影响灭菌验证的效果与可靠性。生物指示物的原

理是通过检测其中的细菌芽孢是否存活来判断产品是否达到完全灭菌的效果。

产品上的微生物无法经过肉眼观察，而且无法通过灭菌后的抽样检测来确定该批次

产品是否合格，是一个特殊过程。我们只能通过

生物指示物中的细菌芽孢模拟产品上带菌的最

坏的情况。生物指示物中的细菌芽孢也是微生物

的一种，而且所有对灭菌效果有影响的因素都对

其有作用。同时，由于采用环氧乙烷等最终灭菌

的产品，其生产过程中初始污染菌的数量是受控

的，其数量远远低于生物指示物所含的菌体数量。

BI中选择的菌株比生产过程中自然环境下所发现的菌株是更难杀灭的菌株，具有更高的

抗力。如果生物指示物中的细菌芽孢全部被杀死，就等同于产品中的微生物全部被杀死。

故此，在环氧乙烷灭菌工艺里面，要确认灭菌是否合格，必须使用生物指示物，没有可

以替代的手段或方法。

但是应当注意，生物指示物并不是用来指示与证实灭菌后的物品确实无菌。也就是

说即使生物指示物培养无菌生长，并不能证实或保证灭菌物品100%无菌。生物指示物

只是用来测试某一个已确认的灭菌过程和采用的的灭菌设备的有效性，这种测试的实施

原理是：按照无菌保证水平对微生物致死性进行评估，以确定灭菌物品中微生物存活的

概率足够低。

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1生物指示物（BiologicalIndicators,BI)

生物指示物是一类特定微生物经过确定制备方法制造的生物试剂。生物指示物对于

某种灭菌工艺具有特定的耐受性（《》）。

USPS1035BiologicalindicatorsforSterilization

所选用的菌株变异性小，各项生物学特征均一性好的菌种；具备相应灭菌过程的抗力，

且比现有生产过程中自然环境下所发现的菌株更难杀灭的菌株来作为生物指示物。

*注：详细生物指示物信息参考:GB18281.1-2015/ISO11138-1:2017;GB

18281.2-2015/ISO11138-2:2017)

注意：两个术语的区别“指示物（indicator）”和“指示剂（indicatoragent;

indicatorreagent)”。指示物是指示剂与其衬底以最终应用形式的组合，就是最终使

用的含有指示剂的产品。指示剂是指活性物质或活性物质的组合。（GB18282.1-2015，

定义3.5与定义3.6；详见附录E），目前一般把两者混用，多指生物指示物。

指示剂；衬底

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2生物指示物种类

常用的生物指示物可分为菌片类、自含式生物指示物、菌悬液三大类：

自含式BI菌片菌悬液

菌片一般是枯草杆菌黑色变种芽孢附着在试纸上面的一种指示剂，把菌片放置于灭

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菌柜内最难灭菌的部位（温度最低点），灭菌完成后，经过天℃培养基培养，观

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察有无细菌生长来确定灭菌是否合格。

自含式指示剂一般是一个小塑料瓶子，里面包含菌片和培养基。灭菌以后，只要把