DB43T 2700-2023 羊肚菌液体发酵制种技术规程.docxVIP

ICS65.020.20CCSB35

DB43

湖南省地方标准

DB43/T2700—2023

羊肚菌液体发酵制种技术规程

Technicalregulationforliquidfermentationofmorchellastrains

2023-08-22发布2023-11-22实施

湖南省市场监督管理局发布

DB43/T2700—2023

I

目次

前言 Ⅲ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4场地与设施 1

5液体菌种发酵 2

6液体菌种转接 3

7废弃物处理 3

8档案管理 3

附录A（资料性）羊肚菌摇瓶种培养基配方 4

附录B（资料性）羊肚菌液体发酵培养基配方 5

附录C（资料性）羊肚菌液体发酵制种档案 6

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III

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖南省农业农村厅提出。

本文件由湖南农业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：湖南省微生物研究院、中南林业科技大学、湖南省产商品质量监督检验研究院、益阳欣博农业发展有限公司、湖南湘蕈生物科技有限公司、常德市永春堂生物科技有限公司。

本文件主要起草人：许隽、范婷婷、钟文涛、杨迪、唐少军、马文华、任锐、贺月林、喻桃生、邵晨霞、杨祎、朱华珺、马文杰。

DB43/T2700—2023

1

羊肚菌液体发酵制种技术规程

1范围

本文件规定了羊肚菌液体发酵制种的场地与设施设备、液体菌种发酵、液体菌种转接、废弃物处理、档案管理等技术要求。

本文件适用于湖南省内梯棱羊肚菌液体发酵制备栽培种。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T150.4压力容器第4部分：制造、检验和验收GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T12728食用菌术语

GB50073洁净厂房设计规范

NY/T528食用菌菌种生产技术规程NY/T1846食用菌菌种检验规程

NY/T1935食用菌栽培基质质量安全要求DB43/T2326桑黄液体菌种生产技术规程DB43/T2327羊肚菌菌种质量检验规程

3术语和定义

GB/T12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1

羊肚菌morchellaspp.

隶属子囊菌门（Ascomycota）、盘菌纲（Discomycetes）、盘菌目（Pezizales）、羊肚菌科（Morchellaceae）、羊肚菌属（Morchella），因其外表凹陷状似羊肚而得名。

4场地与设施设备

4.1场地环境

液体发酵制种场地环境条件应符合NY/T528的规定，生产用水应符合GB5749的规定。4.2设施设备

厂房应符合GB50073的规定，压力容器应符合GB/T150.4的规定。

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2

5液体菌种发酵

5.1工艺流程

母种制备→摇瓶种制备→发酵罐准备→基质配制→灭菌→冷却→接种→发酵培养→菌种检测→菌种保藏。

5.2母种制备

母种制备应符合NY/T528的规定。

5.3摇瓶种制备

5.3.1培养基

原料应符合NY/T1935的规定，配方参照附录A。

5.3.2装液量

采用1000mL三角瓶，装液量为300mL～400mL,用纱布和牛皮纸封口。

5.3.3灭菌

采用高温高压灭菌，在121℃~126℃,0.11MPa～0.16MPa条件下，保持20min～30min。

5.3.4接种

培养基冷却至常温，在无菌条件下将母种打孔成直径约10mm的菌丝块，每100mL液体培养基接种3～5个菌丝块。

5.3.5培养

在18℃条件下静置培养2d～3d，待菌丝块萌发出白色菌丝体后，置于振荡培养箱，120r/min振荡培养4d～5d，即可培养出成熟的摇瓶菌种，菌