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水产苗种中硝基呋喃类原药残留量的测定液相色谱-串联质谱法

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1范围

本标准规定了水产苗种中硝基味嘀类原药残留量测定的液相色谱-串联质谱法。

本标准适用于水产苗种中味嘀性啊、味嘀西林、味嘀妥因和味嘀它啊残留量的测定。

Σ渐范性引用文件

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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

农业部1192号公告-1-2009水产苗种违禁药物抽检技术规范

3原理

样品中硝基味嘀类原药残留用甲醇-偏磷酸溶液提取,经固相落取柱净化后,用液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。

4试剂和材料

试验用水应符合GB/T6682中一级水的规定。所用试剂除另有指定外,均为分析纯。4.1甲醇：色谱纯。

4.Σ偏磷酸。

4.3乙酸馁。

4.40.2%偏磷酸溶液：0.2g偏磷酸加100mL水溶解,混匀。

4.5甲醇-偏磷酸溶液（40+60）：甲醇（4.1）40mL加0.2%偏磷酸溶液（4.4）60mL,混匀。

4.65.0mmo1/L乙酸馁溶液：称取乙酸馁（4.3）0.19g用水溶解并定容至500mL。

4.7标准品：味嘀性啊和味嘀西林纯度均为99.0%,味嘀妥因纯度为98.5%,味嘀它啊纯度为94.0%。4.8标准储备液（100μg/mL）：准确称取味嘀性啊、味嘀西林、味嘀妥因和味嘀它啊各适量,用甲醇溶解并定容至100mL棕色容量瓶中,配成浓度为100μg/mL的标准储备液,-18校冰箱中保存,保存期6个月。

4.9混合标准工作溶液：使用前取标准储备液（4.8）,用甲醇稀释成所需浓度。

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱仪,配电喷雾（ESI）离子源。

5.Σ绍准混合器。

5.3离心机：7000r/min。

5.4天平（感量0.001g）。

5.5分析天平（感量0.00001g）。

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2.eHΓB回相蕊敢性（Q0Ⅲ号,3ⅢΓ)。

2.」词成机。

2.8超声波清洗Ⅸ。

2.δ氮吹Ⅸ。

e其样的测定

e.l样品的制备

我的次不部IIδS合公品-I-S00δ水公里坤连樂和物抑投投*測狽执行。

e.2样品的提取

糾敢司浆启蚌皆I0.0号士20ⅢΓ离心管中,冲入I2ⅢΓ由虹—憎踐购格服（寸.2）,绍准谐合30s，超声提取10min，7000r/min离心10min，取上清液于至另一离心管中，再用15mL甲醇-偏磷酸溶液提取次，合并上清液，备用。

6.3样品的净化

HLB回相蕊取小柱依次用5mL水和5mL甲醇活化，取备用液全部过柱（流速不超过1mL/min），用5mL10%甲醇淋洗，用5mL甲醇洗脱，35托水港賞疇成延士。残渣用流动相溶解，定容至1mL，过0.22μm辉瞭，供高效液相年爆-串联成爆Ⅸ飒定。

6.4测定

6.4.1色谱条件

a）年爆柱：BEHC18，2.1×100mm，1.7μm；或相寻者。

b）流和相：V相：2.0ⅢⅢOI\Γ社购協格服：B相：由虹。

c）流運：0.S2ⅢΓ\ⅢJn。

d）进蚌專：I0μΓ。

e）性猎：32托。

f）流和相協成烁服程体泥系I。

表1流动相梯度洗脱程序

时间，min

A相，%

B相，%

0

95

5

1.0

95

5

3.0

5

9