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pcr扩增实验报告0001.pdfVIP

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per扩增试验报告

篇一:DNA提取及PCR扩增试验报告

PCR扩增及DNA琼脂糖凝胶电泳刘琳

1131428环境科学

—试验目的

1.学习并把握PCR扩增的根本原理与

试验技术。

2.对扩增后的DNA进展琼脂糖凝胶电

泳试验,并分析相应结果。

二、试验原理1.PCR扩增

多聚酶链反响[PCR)技术的原理类

似于DNA的自然复制过程。在微量离心管

中参加适量缓冲液,参加微量模板DNA、四

dNTP)Taq

种脱氧核甘酸〔、耐热聚合酶及

两个合成DNA的引物,而后加热使模板

DNA在高温下[94℃)变性,双链解链,这

是所谓变性阶段。降低溶液温度,使合成引

物在低温55℃〕温度进展剩余的循环。这使

得在较为严紧的条件下可以获得目的模板

的局部拷贝。

篇二:PCR试验报告一般生物学试验报

试验名称:用PCR扩增的方法鉴别不

同物种来源的肌肉一、特异性目的片段DNA

的扩增〔一)试验原理

聚合酶链式反响PolymeraseChain

Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA

片段的一种方法,其根本原理为DNA的半

保存复制。PCR技术由①高温变性模板;

②引物与模板退火;③引物沿模板延长这3

步反响组成一个循环,通过屡次循环反

响,目的DNA得以快速扩增。其主要步骤

是:将模板DNA置于高温下(通常为

93℃-94℃),

使其变性解成单链;人工合成

的两个寡核甘酸引物在其适宜的复性温度

下分别与目的基因的两条单链互补结合;

热稳定DNA聚合酶T叫酶)在72℃将单

3,

核甘酸从引物的端开头掺入,以目的基

10

53’

由于模板按一的方向延长,合成互补

链。

本试验承受物种特异性引物扩增的方

法来鉴定3种不同物种来源的肌肉。以不同

物种来源的动物DNA为模板,用物种特异

性的引物进展PCR扩增,只有在模板和引

物的物种相对应的状况下才会有特异性条

带的消灭。应用此方法,可以特异性地检测

样品中痕量的特定DNA成分。

.

〔二)试验步骤不同反响体系的配制

按下表将各成分分别参加一做好标记

的无菌PCR管中,配制50(11的PCR反响体

系,留意酶要最终加,加完后将PCR管放置

在冰上。

1.将上述混合液稍加离心,约10s左右。

取下后马上置于PCR仪中,盖紧热盖,定好

PCR仪的反响程序,执行扩增程序。

反响程序为:

预变性94℃5min11

变性94℃5s退火50℃5s

延伸72℃20s后延长72℃5min

2.反响完毕后,终止程序,将PCR管取

4℃,30

出,放置于待电泳检测。循环

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