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链球菌检验作业指导书
1主题内容与适用范围
本作业指导书规定了链球菌的检验方法。
本作业指导书适用于患者的生物样品(如:尿液、脓液、脑脊液、痰等)及医院物体表面涂抹
样本及使用中消毒剂链球菌的检验。
2引用标准
GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
全国临床检验操作规程(第三版)
临床微生物学诊断与图解(第二版)周庭银编著
3设备和材料
3.1无菌棉拭子。
3.2无菌5cm×5cm规格板。
3.3温箱:36±1℃,42℃。
3.4显微镜。
3.5灭菌广口瓶:500mL。
3.6灭菌三角烧瓶:500mL,250mL。
3.7灭菌吸管:10mL、1mL。
3.8天菌平皿:90mm×15mm。
3.9灭菌小试管:内径3mm,长5cm。
3.10灭菌毛细管。
3.11无菌注射器:5mL、10mL
3.12橡皮乳头。
3.13载玻片。
3.14酒精灯。
3.15灭菌金属匙或玻璃棒。
3.16接种棒、镍铬丝。
3.17试管架、试管篓。
4培养基和试剂
4.11%葡萄糖肉汤:按GB/T4789.28中4.1规定。
4.2血琼脂平板:按GB4789.28中4.6规定。
4.3SCDLP液体培养基:按卫生部《消毒技术规范》附录A.23中规定。
4.4麦康凯琼脂:按GB4789.24中4.4规定。
4,56.5%氯化钠肉汤:见附录A1。
4.6马尿酸钠培养基:按GB/T4789.28中3.9规定。
4.7过氧化氢酶试验:按GB4789.28中3.21规定。
4.8蛋白胨水、靛基质试剂:按GB4789.28中3.13规定。
4.9氨基酸脱羧酶试验培养基:按GB4789.28中3.12规定。
4.10糖发酵管:按GB4789.28中3.2规定。
4.11溶血性检查:见附录A1。
4.12杆菌肽敏感试验:见附录A4。
4.13CAMP试验:见附录A5。
4.14胆汁-七叶苷试验:见附录A6
4.156.5%NaCl生长试验:见附录A7。
4.16Optochin敏感试验:见附录A3
4.17吡咯烷酮芳氨酶(PYRase)试验:见附录A9。
5检验程序:见图1
图1:链球菌检验程序
食物中涂抹拭子、使用中的消
尿液、脓液、痰等
毒标本毒剂用相应中和剂肉汤
中和后取5mL
1%葡
涂血平板36℃±1℃萄糖肉
片
镜平板18~24h汤增菌
检
36℃±1℃18~24h
挑选具有α、β或γ溶血环的可疑
菌落转种血琼脂平板分纯培养。具有γ溶血环的菌落
进行涂片染色镜检
36℃±1℃18~24h
具有β溶血环的菌落具有α溶血环的菌落触媒阴性、革兰氏阳
进行涂片染色镜检进行涂片染色镜检性链状或单个排列
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