生物化学的生物合成和加工.ppt

*感谢大家观看第90页,共90页，星期六，2024年，5月*******RNaseⅢRNaseⅢRNaseE甲基化碱基甲基化核糖第58页,共90页，星期六，2024年，5月(二)tRNA的加工

大肠杆菌染色体有tRNA基因约60个原核生物tRNA转录初始物:tRNA基因:◆Ⅰ型---tRNA有3’-CCA-OH◆Ⅱ型---tRNA无3’-CCA-OHtRNA转录初始物:◆与rRNA相连◆几个相同(不同)tRNA连在一起多顺反子转录单位第59页,共90页，星期六，2024年，5月●加工RNA酶ⅢRNA酶FRNA酶DRNA酶PtRNA核苷转移酶切开rDNA、tDNA转录产物间隔序列从3’端切断前体分子核酸外切酶,切除Ⅰ型tRNA3’-CCA-OH下游序列（核酸+蛋白）（M1RNA）内切酶，tRNA5’端成熟酶催化Ⅱ型tRNA形成稳定的3’-CCA-OH“斩头”，去尾，剪接，3’-末端添加，化学修饰第60页,共90页，星期六，2024年，5月原核生物tRNA前体分子的加工b、末端添加：3’-端添加CCA序列。c、修饰：形成稀有碱基如DH2。RNAasePRNAaseFRNAasePRNAaseFRNAaseDRNAaseDACC???表示核酸内切酶的作用表示核苷酸转移酶的作用表示核酸外切酶的作用表示异构化酶的作用第61页,共90页，星期六，2024年，5月（三）mRNA的加工原核细胞的mRNA通常没有转录后的加工过程。第62页,共90页，星期六，2024年，5月真核生物的转录后加工第63页,共90页，星期六，2024年，5月4种rRNA，是两个转录单位。18S、5.8S和28SrRNA的前体是45S（一个转录单位）。5SrRNA是单独的一个转录单位。核仁是其转录、加工和装配成核糖体的场所。一、rRNA的转录后加工第64页,共90页，星期六，2024年，5月40S亚基60S亚基大多数真核细胞为成熟的28S18S5.8SrRNA的共同前体rRNA由核酶催化进行自身剪接第65页,共90页，星期六，2024年，5月转录45S-rRNA剪接18S-rRNA5.8S和28S-rRNArDNA内含子内含子28S5.8S18S32S多数真核生物的rRNA基因不存在内含子，有些含有内含子但并不转录，如果蝇。四膜虫可以自动切去内含子第66页,共90页，星期六，2024年，5月tRNA前体RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA二、tRNA的转录后加工RNA聚合酶Ⅲ催化合成第67页,共90页，星期六，2024年，5月RNAaseP、内切酶第68页,共90页，星期六，2024年，5月tRNA核苷酸转移酶、连接酶ATPADP第69页,共90页，星期六，2024年，5月碱基修饰（2）还原反应如：U?DHU（3）核苷内的转位反应如：U?ψ（4）脱氨反应如：A?I如：A?Am（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）约有10%需要酶促修饰第70页,共90页，星期六，2024年，5月三、真核生物mRNA的转录后加工核内的初级mRNA称为核不均一RNA(hnRNA)定义：mRNA的原初转录物是相对分子量极大的前提，在核内加工过程中形成大小不等的中间体，即hnRNA特点：平均分子长度为8-10Kb左右。比mRNA的平均长度(1.8-2Kb）要大4-5倍。hnRNA仅有总量的1/2转移到细胞质内，其余的都在核内被降解掉。第71页,共90页，星期六，2024年，5月LOREMIPSUMDOLORhnRNA是mRNA的前体，证据是：(1)hnRNA和mRNA有相同的序列；(2)hnRNA在体外能作为模板翻译蛋白；(3)两者5′端都有帽子结构，表明二者为相同的聚合酶所合成；(4)两者的3′端都有多聚腺苷有尾巴。第72页,共90页，星期六，2024年，5月（一）首、尾的修饰5?端形成帽子结构(m7GpppGp—)3?端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)加工过程包括：首、尾、剪接、甲基化第73页,共90页，星期六，2024年，5月帽子结构(m7GpppGp—)

第74页,共90页，星期六，2024年，5月5?pppGp…5?GpppGp…pppGppi鸟