分光光度法近年原文.ppt

分光光度法分光光度法：也叫吸光光度法，是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，包括可见及紫外分光光度法及红外分光光度法等。本章重点讨论可见光区的吸光光度法。2、特点：仪器设备和操作简单灵敏度高(10-4~10-7g/ml)应用广泛精确度和准确度高Ⅰ、光谱分析(Spectralanalysis)波动性是指光按波动形式传播。粒子性是指光是由光量子或光子所组成的。短波的能量大，长波的能量小。结论：一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低，反之，波长越短(频率越高)，光量子的能量越高。(2)单色光和复合光

单色光：具有相同能量(相同波长)的光。

复合光：由不同单色光组成的光。例如：阳光和白炽灯发出的光均为复合光

(3)可见光和互补光

可见光：指人的眼睛所能感觉到的光，包括的波长范围为：400~760nm。

互补光：将两中适当颜色的光按一定的强度比例混合，如果能形成白光，则这两种光称为互补光。物质对光的选择性吸收一种物质呈现何种颜色，是与入射光的组成和物质本身的结构有关。溶液呈现不同的颜色是由溶液中的质点（离子或分子）对不同波长的光具有选择性吸收而引起的。当白光通过某一有色溶液时，该溶液会选择性地吸收某些波长(wavelength)的光而让未被吸收的光透射过，即溶液呈现透射光的颜色，亦即呈现的是它吸收光的互补光的颜色。例如：KMnO4溶液能选择吸收了白光中的绿光，与绿色光互补的紫色光因未被吸收而透过溶液，所以KMnO4溶液呈现紫色。应用：二、光吸收的基本定律1、定律：单色光通过吸光溶液后，吸光度与溶液的浓度和厚度之间呈正比关系（1）Lambert定律：说明吸收与溶液液层厚度间的关系透光率与吸光度透光度(透射比）T：T=I/I0溶液的透光率愈大，表示它对光的吸收愈小；相反，透光率愈小；表示它对光的吸收愈大。吸光度A与溶液的透光率的关系为A=lg(1/T)=-lgT（2）Beer定律：说明吸收与溶液浓度间的关系2、表达式：-lgIt/Io=-lgT=K?L?cA=-lgT=K?L?cIt/Io为透光率(Transmittance,T)A为吸光度(Absorbance)K为吸光系数(absorptivity)L为液层厚度c为溶液浓度(concentration)③吸收曲线用不同波长(400-720nm)的光，照射某一吸光物质的溶液；测吸光度(A)，以波长?为横坐标，吸光度A为纵坐标得到的一条曲线，直观地表示出物质对光的吸收特征。它反映某溶液对不同波长单色光的吸收程度。在最大吸收波长处测定吸光度，则灵敏度最高。不同物质吸收光谱的形状以及?max不同——定性分析的基础。同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax不同——定量分析的基础。3、所用仪器：分光光度计(spectrophotometer)（1）主要部件：（2）使用： 5.盖上箱盖(光路开关自动打开)，再用空白管调T=100%(若调不到，则可调节灵敏度开关) 4、比色法的定量方法：①标准曲线法:将一系列浓度不同的标准溶液按照一定操作过程显色后，分别测吸光度(A)，以A为纵坐标，浓度为横坐标制标准曲线(至少要5点)。在相同条件下处理待测物质并测定其吸光度，即可从标准曲线找出相对应的浓度III. 实验内容1.可见光分光光度计波长校正**1、光的基本性质(1)光具有二象性：波动性和粒子性光是一种电磁波，按照波长或频率排列可得到下表所示的电磁波谱表：核磁共振光谱法1~1000m射频微波光谱法1~1000mm微波红外光谱法50~1000?m远红外红外光谱法2.5~50?m中红外红外光谱法0.75~2.5?m近红外比色法,可见吸光光度法400~760nm可见光紫外光谱法200~400nm近紫外真空紫外光谱法10~200nm远紫外X射线光谱法0.1~10nmX射线中子活化分析,莫斯鲍尔谱法0