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实验-氨基酸红外吸收光谱的测定 (1).docx

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实验氨基酸红外吸收光谱的测定

一、实验目的

1、熟悉固体样品压片技术。

2、掌握红外光谱测试方法与仪器使用规程。

3、练习红外光谱解析方法。

二、实验原理

物质分子中的各种不同基团,在有选择地吸收不同频率的红外辐射后,发生振动能级之间的跃迁,形成各自独特的红外吸收光谱。据此可对物质进行定性、定量分析。特别是对化

合物结构的鉴定,应用更为广泛。

基团的振动频率和吸收强度与组成基团的原子质量、化学键类型及分子的几何构型等有关。因此根据红外吸收光谱的峰位置、峰强度、峰形状和峰的数目,可以判断物质中可能存在的某些官能团,进而推断未知物的结构。如果分子比较复杂,还需结合紫外光谱、核磁共振谱以及质谱等手段作综合判断。最后可通过与未知样品相同测定条件下得到的标准样品的

谱图或已发表的标准谱图(如Sadtler红外光谱图等)进行比较分析,做出进一步的证实。

三、仪器与试剂

1、AVATAR360FT-IR型红外光谱仪(美国Nicolet公司),压片机,玛瑙研钵;

2、光谱纯KBr,丙氨酸,苯丙氨酸;苏氨酸,缬氨酸;丝氨酸,半胱氨酸。

四、实验步骤

1、开机

⑴开启电脑,运行OMNIC操作软件。检查电脑与主机的通讯。

⑵仪器稳定后,方可进行测量。

2、测量

⑴确认样品室无样品,选择合适的背景,按samplecollection,按提示以空气做背景进

行背景扫描;

⑵准备样品(如用压片机或液体池等)取干燥样品1~2mg与200mg光谱纯KBr放入玛瑙研钵中,混匀研细,取适量放入压片模具中,将模具置于压片机中,20MPa压2min。减

压、退模。即得一透明片子;

⑶将待测样品放在样品架上后放入样品室的光路中,再按提示,进行样品扫描;

⑷对图谱进行“Adsorb”变换后,再“AutoBaseline”进行基线校正,之后回到

“Transmission”。调用“Findpeak”进行自动找峰,或者进行手动找峰等处理。

⑸按print打印光谱图

五、数据处理

氨基酸对比解谱练习,根据理论课教材找出各峰归属:

对照分组:①丙氨酸,苯丙氨酸;②苏氨酸,颉氨酸;③丝氨酸,半胱氨

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