2024高考生物一轮复习学案第9单元微专题10pcr技术与电泳相关问题(人教版新教材).docxVIP

eq\a\vs4\al(PCR技术与电泳相关问题)

题型一PCR技术的相关计算

1.PCR扩增过程中的循环图示与规律

2.PCR中的数量关系

循环次数

1

2

3

n

DNA分子数

2

4

8

2n

含引物A(或B)的DNA分子数

1

3

7

2n－1

同时含引物A、B的DNA分子数

0＝21－2

2＝22－2

6＝23－2

2n－2

共消耗的引物数量

2＝21＋1－2

6＝22＋1－2

14＝23＋1－2

2n＋1－2

3.PCR技术的应用——新冠病毒核酸检测

(1)RT-PCR

RT-PCR是将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式反应(PCR)相结合的技术。首先经逆转录酶的作用，由RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，在DNA聚合酶的作用下扩增合成目的片段。

提醒因为新冠病毒中的核酸为RNA，而RNA极易降解，为了防止RNA在检测过程中降解，我们把它转换为更稳定的DNA。

(2)实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累，实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

TaqMan探针法是其中一种检测方法。探针完整时，荧光报告基团(R基团)发射的荧光信号被荧光淬灭基团(Q基团)吸收；PCR扩增时，耐高温的DNA聚合酶的5′→3′外切酶活性将探针酶切降解，使荧光报告基团和荧光淬灭基团分离，从