紫外可见分光光度法.ppt

在456nm处，用1cm比色皿测定锌，数据如下：C：2.004.006.008.0010.00A：0.1050.2050.3100.4150.515求：1.绘制吸收曲线2.K3.A=0.260时C=？*小结5.pH值的选择1.测量波长的选择3.狭缝宽度的选择4.显色剂用量的选择2.吸光度范围的选择最大吸收波长A在0.2~0.8之间一般2nm缝宽曲线平坦部分曲线平坦部分*课后思考题在用邻二氮菲测定铁含量时,操作如下:铁标准溶液中依次加入:盐酸羟胺溶液，邻二氮菲，醋酸钠溶液。这些试剂的作用分别是什么?四、参比溶液的选择参比溶液的类型：1.溶剂参比试样溶液组成简单，其他组分很少且对测定波长光几乎无吸收，显色剂没有吸收，采用溶剂最为参比溶液。2.试剂参比显色剂或其他试剂在测定波长有吸收，按显色反应相同的条件，只是不加入试样溶液，同样加入试剂和溶剂作为参比溶液。为什么需要使用参比溶液？消除溶液中其他成分以及吸收池和溶剂对光的反射和吸收带来的误差，使测得的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。3.样品参比试样基体溶液（除被测组分外的其他共存组分）在测定波长有吸收，且与显色剂不起显色反应，，按与显色反应相同的条件处理参比，只是不加显色剂。4.平行操作溶液参比显色剂、样品基体都有吸收，用不含被测组分的试样，在相同的条件下与被测试样同时进行处理主要的几种干扰情况：1.共存离子本身有颜色：Fe3+、Cu2+2.干扰物质与显色剂或被测组分形成更稳定的配合物，使显色反应不能进行完全3.干扰物质与显色剂形成有色化合物，在测定条件下有吸收五、干扰及消除方法消除方法1.控制酸度控制酸度使待测离子显色，而干扰离子不生成有色化合物。如：磺基水杨酸测定Fe3+时，若Cu2+共存，此时Cu2+也能与磺基水杨酸形成黄色配合物而干扰测定。若溶液酸度控制在pH=2.5，此时铁能与磺基水杨酸形成配合物，而铜就不能。2.选择适当的掩蔽剂选择掩蔽剂的原则是：掩蔽剂不与待测组分反应；掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分的测定。3.选择适当的测量波长4.分离P26第19题请大家归纳总结可见分光光度法和紫外分光光度法的联系和区别。(定义、条件、仪器、应用)可见分光光度法紫外分光光度法定义基于物质对可见光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法基于物质对紫外光的吸收而对物质进行定性和定量分析的一类方法仪器400-780nm,钨灯,玻璃吸收池200-400nm,氘灯,石英吸收池条件有色溶液；显色剂；控制PH;绘制吸收曲线,选择最大波长减小干扰;合适的参比液绘制吸收曲线,选择最大波长；合适的参比液*会利用可见分光光度计用标准曲线法测定；会选择合适的测定波长；会选择合适的显色剂、显色条件归纳总结可见分光光度计的操作使用；标准曲线法的测定原理和方法；显色剂和显色反应的原理；******1.单光束分光光度计优点：结构简单、价格低廉．缺点：受光源、检测器的波动影响：不能自动记录吸收光谱。国产721型、722型、751型、724型0.575光源单色器吸收池检测器显示二.紫外-可见分光光度计仪器的类型2.双光束分光光度计斩光器优点：能自动记录吸收光谱（自动扫描）；自动消除光源强度变化引起的误差；是目前用得最多的分光光度计．光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射率，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来3.双波长分光光度计切光器将两束光以一定频率交替照射同一吸收池显示器显示两个波长吸光度差值适用于：多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)分析，存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下任务：掌握仪器的基本操作第四节紫外-可见分光光度法的应用紫外-可见分光光度法可用于有机化合物的定性鉴定、结构推断和纯度检验。1.未知化合物的定性鉴定定性依据：吸收光谱的形状、吸收峰位置、吸收峰的数目等。方法：相同条件下，测定未知物和已知标准物的吸收光谱，对比图谱。目前最常用的标准图谱：萨特勒标准图谱库一、定性分析一、定性分析与标准谱图对照1.未知化合物的鉴定与标准物质谱图对照最常用：萨特勒标准图谱共收集46000种化合物的紫外吸收光谱，查找方便2.有机化合物结