急性白血病的诊断分型和预后.pptVIP

FSC:细胞大小SSC:细胞内颗粒多少及细胞内构造的复杂性FL：3-10多种（荧光素耦联的单克隆抗体）01流式I02FCM检测的参数正常BM细胞的图形（CD45/SSC）流式IR8：幼稚细胞群，正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺流式细胞术判断急性白血病：20%或者25%以上细胞表达早期标志（CD34、HLA-DR、TdT）或者不表达成熟标志系别标志：髓系B系T系12345流式I白血病细胞的系列特异性标志髓系MPO+（用FCM，免疫组织化学染色，细胞化学染色证实）或单核细胞（至少有以下标志中的2项阳性：NSE、CD11c、CD14、CD64、CD36*、溶酶体T细胞系cCD3+(用抗CD3ε链的单抗及FCM分析，不能用免疫组化的抗CD3ζ链多克隆来检测，因为后者不是T细胞特异性抗原)或sCD3+B细胞系CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性：CD79a、cCD22、CD10或CD19弱阳性并同时有以下标志中的至少2项阳性：CD79a、cCD22、CD10如有2系或以上的特异性标志，可诊断为急性混合性白血病流式IAML(病例1）流式IALL(病例2）流式IFCM的优缺点流式I一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记，可同时检测每个细胞的六个以上参数，敏感性高，分析全面更容易区分良恶性，恶性细胞的系列及成熟度可帮助确定免疫治疗的靶点并监测疗效，如CD20、CD19是监测MRD覆盖面最广的方法。快速、简便、重复性好优点：01不能确定组织结构，一些罕见的大细胞不能分析到，一些细胞粘附性高，难以抽出。因此对HL等难以确诊。判断恶性细胞的比例不如形态准确，对M6、MDS的诊断不如形态预后价值不如染色体和基因缺点：02原始细胞增多是诊断前体恶性血液病尤其AL的重要指标，但原始细胞应根据免疫学标志/基因/染色体证实为恶性造血前体细胞一些形态上的原始细胞可以是正常造血细胞（尤其见于儿童感染后，G-CSF,GM-CSF等刺激或化疗后或移植后）诊断误区举例病例3儿童B-ALL,化疗3年后停药，来我院复查，骨髓涂片8%的幼稚细胞流式幼稚B淋巴细胞增生，未见异常表型病例4NK细胞白血病移植后40天，骨髓涂片8%的幼稚细胞流式:未见表型异常细胞，CD34阳性细胞为幼稚B淋巴细胞细胞遗传学C中期分裂相的染色体分析AML：50%~90%的患者细胞遗传学可检出异常克隆ALL：大约60%～85%的患者可检出克隆性染色体畸变细胞遗传学C一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常，如t(8;21)，inv(16)、t（16；16）、t(15;17)（q22;q12），t(5;14)(q31;q32)，t(3;3),t(4;11)可直接诊断急性白血病；一些染色体和/或基因有辅助诊断价值，如5q31、CEP7、7q31、CEP8、20q、CEPY、P53高度疑似MDS等；有-7、5q-、t(3;3)、t(4;11)、t(9;22)、复杂染色体等的急性白血病预后不好染色体的诊断价值0102细胞遗传学C有丝分裂相少或缺如染色体质量低劣，显带不佳染色体异常复杂如果恶性细胞不分裂，其结果是假阴性由于分析的细胞少，有部分白血病患者无染色体异常，监测残留白血病不敏感01白血病染色体分析存在的问题：02细胞遗传学C荧光原位杂交（FISH）利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直接标记后与靶DNA进行杂交，最后在荧光显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析细胞遗传学CBCR/ABL双色双融合探针BCR/ABL额外信号探针有独立的诊断及预后价值可以检测出显微镜下人眼难以分辨的染色体异常诊断时间比染色体短与染色体分析比较，对诊断人员的经验依赖程度低对不分裂的细胞也可以分析，分析的细胞数量比染色体多，更能反映正常和恶性细胞的比例，监测残留白血病比染色体敏感可以对既往的骨髓片回顾分析，进一步明确或排除诊断探针昂贵，每次只能分析1-2种异常，只能分析已知的染色体或基因异常FISH的优缺点细胞遗传学C********************急性白血病的诊断、分型和预后白血病的概念白血病是造血干/祖细胞发生恶变白血病的概念分化障碍增殖失控原始和幼稚细胞增生累积凋亡受阻浸润其它器官和组织原始和幼稚细胞（白血病细胞）正常造血受到抑制：乏力、面色苍白、发热、出血01浸润：肝脾淋巴结肿大、皮肤、中枢神经系统等浸润