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4、缺失作图(掌握)
目的:判断不同突变型在染色体上的位置
规律:若与某种缺失不能重组则位于该缺失区域内;;第五章病毒的遗传分析;病毒为单倍体,根据宿主细胞的不同将病毒分为:动物病毒、植物病毒和细菌病毒(噬菌体);;
;一、噬菌体结构;3.根据噬菌体与宿主的关系,将噬菌体分为:
烈性噬菌体:感染宿主细胞后就进入裂解反应,使
宿主细胞裂解,如大肠杆菌T噬菌体系列。
温和噬菌体:感染宿主细胞后具有裂解和溶源两种
发育途径,如P1和λ噬菌体。;第五章病毒的遗传分析;结构大同小异,外貌一般呈蝌蚪状
头部:双链DNA分子的染色体;
颈部:中空的针状结构及外鞘;
尾部:由基板、尾针和尾丝组成。;;T4噬菌体的感染过程;(二)、温和噬菌体;λ和P1噬菌体
λ和P1各代表一种略有不同的溶源性类型
λ噬菌体:通过交换整合到细菌染色体上,λ噬菌体随细胞染色体复制而复制,细胞中有一个拷贝。
P1噬菌体:侵入后并不整合到细菌的染色体上,而是独立存在于细胞质内;P1噬菌体复制则使每个子细胞中至少含有一个拷贝。
;λ噬菌体;;噬菌体的各种突变型
1、噬菌斑形态突变(plaquemorphology)
2、寄主范围突变:(hostrange,h)
3、条件致死突变:限制条件下不能繁殖
许可条件下可以繁殖
;常用的两类条件致死突变:
温度敏感条件致死突变(ts):基因突变后所编码的蛋白质在限制温度下不稳定而丧失活性。
抑制因子敏感突变(sus):突变使得原来正常的密码子变成了终止密码,因而翻译提前终止,不能形成完整肽链和有活性的蛋白质。分为三类:
UAG(amber),UAA(ocher),UGA(opal)
琥珀突变赭石突变乳白突变;三种突变只有在带有无义抑制基因
的宿主中可产生后代;
例如:噬菌体结构基因细菌tRNA基因反密码子
正常突变突变正常
基因:5`TAC3`?5`TAG3`3`ATC5`?3`ATG5`
????
mRNA5`UAC3`5`UAG3`3`AUC5`3`AUG5`
??
表型:酪氨酸终止
5`UAG3`;三、噬菌体突变型在遗传学中的应用
(一)、T系噬菌体
1.基因组结构特点
T2和T4噬菌体相似,它们的大部分基因和遗传结构是相同的。放射自显影显示T2染色体是一个线状DNA,但是它们的遗传图却是环状的。
;环状排列与末端重复;形成环状排列的原因;2.T系噬菌体突变型的应用
T2的重组测验---两点测交
T4的重组测验---三点测交
T4的互补测验;r+:小噬菌斑,直径为1mm左右,周边有朦胧的光环。
r-:大噬菌斑,直径约2mm左右,周缘清晰。;野生型h+噬菌体:能侵染菌株B,但不能侵染菌株B/2,所以把h+噬菌体接种到B和B/2的混合培养物时,噬菌斑是半透明。
突变型h-噬菌体:既能侵染菌株B,也能侵染菌株B/2,所以把h-噬菌体接种到B和B/2的混合培养物时,噬菌斑是透明。;第五章病毒的遗传分析;大;第五章病毒的遗传分析;
;两个T4噬菌体品系感染E.coli细胞,品系1的基因型是abc,品系2的基因型是a+b+c+。重组后获得如下表的数据。问:a、b和c是否连锁?如连锁确定其顺序和图距;(2)、计算并发系数,其数值代表的意义是什么?;两个基因的噬菌体杂交后所测定的重组率如下:;
;(2)φX174噬菌体突变型在遗传学中的应用
互补实验:
两点测交:
三点测交:;
;
;;第五章病毒的遗传分析;第五章病毒的遗传分析;(3)λ噬菌体在遗传学中的应用
通过互补测验或重组测验可确定λdgal与λdbio品系中λ基因组缺失的范围。如λdgal噬菌体与一系列已知位点的sus突变噬菌体品系杂交,检测它们是否形成野生型重组体,如果λdgal品系中某个待测基因有缺陷,就不会形成野生型重组体。;
;
;
;;;
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