反相色谱法测定尼泊金甲酯(防腐剂).pdf

反相色谱法测定尼泊金甲酯（防腐剂）

一、实验目的

1、了解反相色谱法测定试样中尼泊金甲酯的含量的实验原理和方法；

2、掌握外标法进行色谱定性分析的方法和原理。

二、实验原理

1、尼泊金甲酯的物理、化学性质

又称对羟基苯甲酸甲酯（结构式如右图），又叫尼泊金OO

甲酯，白色结晶粉末或无色结晶，易溶于醇，醚和丙酮，极

微溶于水，沸点270-280℃。主要用作有机合成、食品、化妆

品、医药的杀菌防腐剂，也用作于饲料防腐剂。

OH

2、外标法原理

先测量一系列尼泊金甲酯标准溶液的色谱峰，得到峰面积。然后用峰面积对溶度

作图，得一标准曲线。然后在相同实验条件下测定样品中尼泊金甲酯的峰面积，由

标准曲线上找出该峰面积下所对应的溶度，从而算出试样中尼泊金甲酯的含量。

三、仪器与试剂：

色谱柱：C18（十八烷基硅烷键合硅胶固定相为填充剂），柱长75mm，柱径

4.6mm；10mg/ml的尼泊金甲酯标样（储备液）

流动相：甲醇：水=70:30混合溶剂，流动相流速为1mL/min,检测器：紫外检测

器，254nm

四、实验步骤：

1、标准溶液的配制：用流动相为溶剂，标样储备液为原液配制浓度为

0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL一系列标准溶液。

2.标准曲线的制作：待仪器稳定后，依次进样20μL已知浓度的标准溶液，记录

色谱图（1-5）及保留时间t；

R

3.样品分析：注入20μL未知溶液，记录色谱图（6）及各组分保留时间t；

R

五、数据处理：

根据色谱图1-5中峰面积，绘出峰面积对浓度的标准曲线；

根据步骤2中标样的保留时间确定未知样品中尼泊金甲酯的位置；

根据色谱图（6）确定尼泊金甲酯的峰面积，然后在标准曲线上查出被测组分的浓

度。

表一：一系列尼泊金甲酯标准溶液保留时间及其峰面积：

进样量浓度t/min峰面积

R

mg/ml

0.021.2232838968

0.041.2254219146

0.061.2527403238

0.081.2479370584

0.101.251

s

/

v

u

峰

收

吸8000000

6000000

4000000

2000000

0.020.040.060.08