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博观而约取，厚积而薄发。——苏轼

HPLC含量测定分析方法验证中数据可接受标准讨论

在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析

方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。为规

范对各种分析方法的验证要求，中国药典2005年版附录规定了分析方法

验证的指导原则。该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的

阐述。但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中

也未发现相关的要求。另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识

到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行分析方法验证，

但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。本

文提出了在对HPLC含量测定方法进行验证时的可接受标准，供大家讨论。

1•准确度

该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80%、

100%和120%的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回

收率。

可接受的标准各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收

率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。

2.线性

线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为:

在80%至120%的浓度范围内配制5份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面

丫

积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（），进行线性回

归分析。

可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998,丫轴截距应在

100%响应值的2%以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%

博观而约取，厚积而薄发。——苏轼

3•精密度

1）重复性

配制6份相同浓度或分别配制浓度为80%、100%和120%的供试品溶液各三份的供

试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试

液含量的相对标准差应不大于2.0%。

2）中间精密度

配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进

行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。

4•专属性

可接受的标准为：空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离

度不得小于2.0。以二极管阵列检测器进行纯度分析时，主峰的纯度因子应大于980。

5•检测限

主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。

6•定量限

主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制6份最低定量限浓度

的溶液，所测6份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于2.0%。

7•耐用性

分别考察流动相比例变化±5%、流动相pH值变