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学而不知道，与不学同；知而不能行，与不知同。——黄睎

比较三代抗体在制备和应用方面的优缺点

摘要：抗体技术的发展主要经历了三个时期，相应产生了三代抗体：多克隆抗体、单克隆

抗体和基因工程抗体。多克隆抗体技术即免疫血清制备技术较简便，但免疫血清特异性较低。

自从第一个单克隆抗体产生以来，单抗已广泛地应用于疾病的诊治上。为了克服传统的鼠源

性单抗存在的弊端，随着分子生物学和细胞生物学的快速发展，基因工程抗体技术取得了比

较大的进展，包括对鼠源性单抗的改造、人源性单抗的研制及对抗体分子结构和功能的改造，

尤其是以噬菌体抗体库技术、核糖体展示技术和转基因小鼠技术为代表的人源性单抗制备技

术的研制最为瞩目。本文就三代抗体在制备及应用方面的优缺点作了简单的比较。

关键词：多克隆抗体单克隆抗体基因工程抗体

抗体(antibody)是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相

应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。

抗体技术的发展主要分为三个时期，1890年EmilA.V.Behring等发现白喉抗毒素，并用

于人工被动免疫，第一代抗体——多克隆抗体(Polyclonalantibody,PcAb)，继而产生。第二代

抗体于1975年，Köhler和Milstein创建杂交瘤技术制备出针对一种抗原决定簇的抗体，称

为单克隆抗体(Moclonalantibody,McAb)，单克隆抗体是均质的异源抗体。20世纪80年代采

用基因工程的手段研制抗体及其与功能的关系，并对抗体基因进行改造和重组等，而制备出

的抗体为基因工程抗体（Geneticengineeringantibody,GEAb），即第三代抗体。[1]

一、多克隆抗体(Polyclonalantibody,PcAb)

1、免疫血清的制备

（1）抗原的制备

制备多克隆抗体对抗原纯度要求十分严格。抗原越纯，获得抗体的特异性越高，要求至

少达到电泳纯或色谱纯。

（2）佐剂（Adjuvant）的应用

对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，常

采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。应用最广的是福氏佐剂（Fraund’s

adjuvant）。

（3）免疫动物

供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类，常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小

鼠等。一般实验室采用的抗体，多用兔和羊制备。免疫用的动物最好选择适龄的健康雄性动

物。抗原的免疫剂量是依照给予动物的种类、免疫周期以及所要求的抗体特性等不同而不

同。免疫动物放血前，常用ELISA法或免疫双扩散测试抗体效价，合格后，即可采血。血液

收集后，进行分离与保存。

2、多克隆抗体的应用

一种良好的多克隆抗血清含有抗某种抗原不同表位的多种抗体。由于多克隆抗血清通常

包含抗某一抗原的不同表位的抗体，包括变性—抗性的表位，所以，在深固定的样本中也会

很好地发挥效应，在石蜡包埋组织切片的染色中，多克隆抗体最常选用。

根据实验的不同需要，多克隆抗体应用于相应抗原的标记。此外，在农业生产中，多克

隆抗体被用于农药残留现场监测[2]；在临床应用中，多克隆抗体主要用于病原物的检测、

疾病的诊断及治疗，如作为蛋白类免疫抑制剂用于移植反应和自身免疫病的治疗[3]。

二、单克隆抗体(Moclonalantibody,McAb)

学而不知道，与不学同；知而不能行，与不知同。——黄睎

1975年,Kohler和Milstein创立了杂交瘤技术制备单克隆抗体[4]，此后单克隆抗体迅速