细胞培养技术的应用及前景讲述ppt课件.pptxVIP

播报人：周亮

制作人：刘国兴

材料收集：鲍岛费景龙

;概述;一分类

1.组织培养(TissueCulture)指的是从体内取出组织摹拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定营养条件下,使之生存和生长并维持其结构和功能的方法。

2.细胞培养(CellCulture):培养物是单个细胞和细胞群。

3.器官培养（OrganCulture）：培养的是器官的原基、器官的一部分或整个器官,使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法.;历史;体外培养技术的发展大致可分三个时期：50年代之前是细胞培养在多个领域发展期；

50年代是细胞培养迅猛发展期，多种培养技术相继建立；

50年代后是体外培养技术与生命科学其他技术结合发展的新时期，诞生了多种培养的应用技术。;由于组织培养在医学研究中的应用，如抗病毒疫苗的生产等，现已经逐渐发展成为一门精细技术。许多细胞株、细胞系的培育成功，尤其是以人的肿瘤组织为材料建立的各种细胞系，如Hela细胞系（Gey，1952），可用来进行一系列研究，更加促进了组织培养技术的发展。

;体内外细胞的差异;培养细胞的分化;培养细胞的形态;组织培养细胞的生长和增殖;1）潜伏期（Latentphase）：细胞从接种到贴壁生长繁殖的一段时间。2倍体细胞该期时间长（24-96h），连续细胞系时间短（10-30min）。;2)指数生长期（Logarthmicgrowthphase）：细胞增殖最旺盛时期，一般用细胞分裂指数（MitoticindexMI）表示：即细胞群中每1000个细胞中的分裂相数。体外培养细胞分裂指数介于0.1-0.5%，且受细胞种类培养液成分、pH、温度等影响。指数生长期是细胞活力最好的时期，在接种细胞数量适宜情况下，指数生长期持续3-5d后，随细胞数量不断增多，生长空间日趋减少，细胞相互接触汇合成片，呈现接触抑制（Contactinhibition）。而恶性细胞则无接触抑制现象，因此接触抑制可作为区分正常与癌细胞标志之一。但癌细胞则由于营养成分的消耗和细胞代谢产物的影响而发生密度抑制（Densityinhibition）。;3）停滞期（Stagnatephase）：即细胞数量达到饱和密度后，细胞与营养液的交换面积减少,代谢产物积累,PH下降细胞停止增殖，进入停滞期。在此时应及时进行换液传代，???则因细胞中毒受损，大量细胞出现死亡，至少再传1-2代后，细胞才能恢复。;细胞培养中应注意的几个问题;1.据CCTV4报道，13年10月中国台湾地区台北荣民总医院在干细胞研究方面有重大突破，研究人员利用干细胞已分化出网膜和心肌细胞，目前该研究正处于临床实验阶段，未来有望生产干细胞药品有效治疗失明、心脏病等。;2.一口好牙不但能给出一个美丽的笑容，还是健康的标志。但由于疾病或意外事故，我们可能失去牙齿。镶颗金牙吧，有损整体美观。现在好了，科学家成功利用人的尿液衍生的细胞诱导形成干细胞获得再生牙齿雏形。7月30日，这项研究成果刊登在学术期刊《细胞再生》上，同时也引发国际社会广泛讨论。;?3.中化新网讯?科学家13年8月表示，他们已利用干细胞，培养出能在培养皿上自发收缩的人类心脏组织，意味在寻求制造移植器官方面获致进展。

???????美国宾州匹兹堡大学研究团队利用取自人类皮肤细胞得出的诱导性多功能干细胞（iPS），制作出名为MCPs的心脏前驱细胞。;4.2013年7月，利用诱导性多功能干细胞（iPSCs），日本科学家首次成功培育出具有功能的人类肝脏。这项发表在《自然》上的研究结果轰动了整个科学界。当前急需器官移植的患者众多，器官的捐献率却常年处于低位。iPS细胞培养的器官有望成为移植脏器的新来源，减少患者对于捐赠器官的依赖。研究小组利用人类诱导性多功能干细胞（iPSCs），在体外培育出简单的人类肝脏，移植到小鼠体内后，这些肝脏成功血管化并正常行使功能。这是科学界首次用诱导性多功能干细胞（iPSCs）培育出具有功能的人类器官。;5.CLS生物治疗的原理是利用自身免疫杀灭肿瘤细胞。2011年诺贝尔医学奖获得者斯坦曼博士在1973年发现了激活免疫系统的关键细胞DC细胞。在20世纪80年代，科学家又培养出了具有肿瘤强杀伤效应的CIK细胞。这两种细胞是肿瘤生物治疗的关键。CLS生物治疗通过体外实验万倍扩增这两类细胞，再输回患者体内实现肿瘤大面积杀伤治疗。CLS多细胞生物免疫治瘤-有效延长生命长度3-5年,保证提升生物质量,实现瘤自我康复.;细胞培养前景;