凝集试验优质文档课件.pptVIP

布鲁氏菌病检测虎红平板凝集试验照片虎红平板凝集试验照片虎红平板凝集试验照片虎红平板凝集试验照片虎红平板凝集试验照片3.2.3.4取0.5ml混合液加入第2管，用该吸管如前述方法混合。3.2.3.5再吸第2管混合液0.5ml至第3管，如此倍比稀释至第4管，从第4管弃去混匀液0.5ml。3.2.3.6稀释完毕，从第1至第4管的血清稀释度分别为1:12.5;1:25;1:50和1:100。3.2.3.7牛、马、鹿、骆驼血清稀释法与上述基本一致，差异是第1管加1.2ml稀释液和0.05ml被检血清。布鲁氏菌病试管凝集反应试验（牛）布鲁氏菌病试管凝集反应试验（羊）注：试管凝集试验简便方法试管凝集试验也可用较简便方式进行，即将血清以0.08毫升、0.04毫升、0.02毫升及0.01毫升分别加入四支小试管内，然后每管加入1：40稀释的抗原1毫升，充分摇匀，这样4管血清的最后稀释度分别为1：25、1：50、1：100和1：2003.3.3.2牛、马、鹿和骆驼1:100血清稀释，猪、山羊、绵羊和狗用1:50血清稀释，出现“++”以上凝集现象时，受检血清判定为阳性。3.3.2.3牛、马、鹿和骆驼1:50血清稀释，猪、山羊、绵羊和狗用1:25血清稀释，出现“++”以上凝集现象时，受检血清判定为可疑反应。布病试管凝集试验照片布病试管凝集试验照片布病试管凝集试验照片布病试管凝集试验照片布病试管凝集试验照片可疑反应家畜经3周~4周后重检，如果仍为可疑，该牛、羊判为阳性。猪和马经重检仍保持可疑水平，而农场的牲畜没有临床症状和大批阳性患畜出现，该畜被判为阴性。猪血清偶有非特异性反应，须结合流行病学调查判定，必须要时应配合补体结合试验和鉴别诊断，排除耶森氏菌交叉凝集反应。1.1牲畜材料中的布鲁氏菌分离培养方法1.1.1流产胎儿培养方法:流产胎儿取来后，先用清水把泥土等污物洗净，然后在3%的来苏儿中浸泡半小时以上，取出在无菌条件下进行解剖。分别取出淋巴结、肝、脾、胃内容物、肺和骨髓等接种在普通培养基或者选择性培养基上，置37℃温箱培养。一般情况下3~5天即可获得阳性结果。2周内无阳性结果可停止培养。牲畜流产胎儿或者死羔犊是布鲁氏菌分离培养最可靠、最有价值的细菌学材料。在流产胎儿的细菌分离中各种器官均有较高的分离率，尤其肺、脾和胃内容物。1.1.2胎衣的检查：取流产和正产的胎衣用清水洗去粪便等污物，再剪下数个子叶，用灭菌生理盐水冲净，然后用灭菌研磨器研碎或剪碎，接种在选择培养基上或做生物学检查。2布鲁氏菌的培养基及其制备方法2.1土豆琼脂培养基：蛋白胨10克琼脂15克氯化钠5克牛肉浸膏5克葡萄糖10克甘油8~12克1:2土豆浸液500毫升蒸馏水500毫升除葡萄糖外，将上述各成分混合熔化，用多层纱布过滤，用20%的氢氧化钠调pH7.2,加入葡萄糖，分装，15磅高压20分钟备用。1:2土豆浸液的制备：新鲜土豆去外皮，切成块，称取500克，放1000毫升蒸馏水中加热煮沸，熟了为止（约10分钟），用纱布过滤，其液体置15磅高压20分钟备用。2.2肝浸液琼培养基：蛋白胨10克氯化钠5克琼脂15克1:4肝浸液1000毫升将上述各成分混合熔化，用多层纱布过滤，用20%的氢氧化钠调pH7.2,分装，15磅高压20分钟备用。1:4肝浸液的制备：取新鲜牛肝（羊和猪肝也可以）去其脂肪和结缔组织后用清水轻轻洗，用绞肉机绞碎称取250克，加入蒸馏水1000毫升，在冰箱中浸泡24小时，取出加热煮沸到熟为止，用帆布或纱布脱脂棉过滤，15磅高压20分钟备用。2.3胰蛋白胨琼脂培养基：胰蛋白胨20克葡萄糖10克氯化钠5克琼脂20克蒸馏水1000毫升先把琼脂放在蒸馏水中加热熔化，然后将上述其余各成分加入熔化，用纱布脱脂棉过滤，调pH6.8~7.0，分装，13磅高压30分钟备用。二、防止与个人防护1防止经皮肤感染、粘膜感染和呼吸道感染1.1防止家畜流产物引起感染：接羔助产人员，在接种羔助产和处理胎儿，死羔时，应做好个人防护，除备有工作服，橡皮围裙、帽子、口罩和胶