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士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎?死而后已，不亦远乎?——《论语》

核酸检测步骤

一、引言

随着新冠疫情的全球爆发，核酸检测成为了疫情防控中必不可少的手

段之一。核酸检测是通过提取样本中的RNA或DNA，利用PCR技术

进行扩增，并通过荧光探针实现对病毒核酸的检测。本文将详细介绍

核酸检测的步骤。

二、样本采集

核酸检测需要采集患者体内的样本，目前常用的样本包括咽拭子、鼻

拭子、唾液、血液等。不同类型的样本采集方法略有不同，但都需要

遵循严格的操作规范。

1.咽拭子采集

咽拭子采集需要使用专用的喉拭子，在患者口腔中取样。具体操作步

骤如下：

（1）请患者张口，将舌头向下压住；

士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎?死而后已，不亦远乎?——《论语》

（2）用另一只手将喉镜插入患者口腔内；

（3）将喉拭子插入喉镜管道内，并顺着舌头向下滑动到悬雍垂处；

（4）在悬雍垂处旋转几次，使喉拭子充分接触到悬雍垂表面；

（5）将喉拭子取出，并放入样本管中。

2.鼻拭子采集

鼻拭子采集需要使用专用的鼻拭子，在患者鼻腔内取样。具体操作步

骤如下：

（1）请患者仰头，将鼻孔向上；

（2）用一只手握住鼻翼，使其张开；

（3）将鼻拭子插入另一个鼻孔中，并顺着鼻腔向上滑动到隆突处；

（4）在隆突处旋转几次，使鼻拭子充分接触到黏膜表面；

（5）将鼻拭子取出，并放入样本管中。

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3.唾液采集

唾液采集需要让患者吐出口腔内的唾液。具体操作步骤如下：

（1）请患者不要进食、喝水和吸烟等活动30分钟；

（2）让患者张开口，将舌头放平；

（3）让患者闭上嘴巴，轻轻地咀嚼口腔内的唾液；

（4）将唾液吐入样本采集管中。

三、样本处理

采集到的样本需要经过处理才能用于核酸检测。一般情况下，样本处

理包括以下几个步骤：

1.样本裂解

样本裂解是将采集到的样本中的细胞或病毒释放出来，使其可以被

PCR扩增。常用的裂解方法有化学法、热裂解法和机械法等。

2.RNA/DNA提取

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RNA/DNA提取是将样本中的RNA或DNA分离出来，以便后续PCR

扩增。常用的提取方法有酚-氯仿法、硅胶柱法和磁珠法等。

3.质量控制

质量控制是为了确保提取出来的RNA/DNA质量良好，可以被PCR扩

增。常用的质量控制方法有比色法、比浊度法和荧光定量等。

四、PCR扩增

PCR扩增是核酸检测中最核心的步骤之一。它通过不断循环加热、降

温和延伸，使目标序列在体系中大量复制，并通过荧光探针实现对病

毒核酸的检测。

PCR扩增一般分为三个步骤：变性、退火和延伸。其中，变性是将

DNA双链分离成两个单链；退火是将引物与模板DNA结合；延伸是

在引物的作用下，通过DNA聚合酶的催化作用使新的单链DNA合成。

五、结果判断

PCR扩增后，需要对PCR产物进行电泳或荧光信号检测，以确定是否

存在目标序列。如果存在目标序列，则说明样本中存在病毒核酸，可

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