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高效液相色谱法同时测定血塞通片中5种皂苷类成分含量
李敏;叶慧;陈骁鹏;姜玮;吴芸
【期刊名称】《《中国药业》》
【年(卷),期】2019(028)018
【总页数】3页(P24-26)
【关键词】高效液相色谱法;血塞通片;三七皂苷R1;人参皂苷Rg1;人参皂苷Re;
人参皂苷Rb1;人参皂苷Rd;含量测定
【作者】李敏;叶慧;陈骁鹏;姜玮;吴芸
【作者单位】江苏省泰州市食品药品检验所江苏泰州225300
【正文语种】中文
【中图分类】R932;R284.1;R286.0
图1高效液相色谱图
血塞通片主要成分为三七药材中的三七总皂苷,有活血祛瘀、通脉活络功效,其现
行标准[1]含量测定项以紫外-可见分光光度法测定三七总皂苷的含量[2]。本研究中
建立了高效液相色谱(HPLC)法同时测定血塞通片中5种皂苷类成分的含量。现
报道如下。
1仪器与试药
1.1仪器
WatersAcquityArc高效液相色谱仪,包括Empower3工作站、四元梯度泵、
2998型二极管阵列检测器、自动进样器和柱温箱(美国Waters公司);8200
型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);Milli-Q型超纯水处理系统(美
国Millipore公司);XS105DU型电子分析天平(瑞士MettlerToledo公司)。
1.2试药
三七皂苷R1对照品(批号为110745-201318,含量94.0%),人参皂苷Rg1
对照品(批号为110703-201530,含量91.7%),人参皂苷Re对照品(批号为
110754-201626,含量97.4%),人参皂苷Rb1对照品(批号为110704-
201424,含量93.7%),人参皂苷Rd对照品(批号为111818,含量92.1%),
均购自中国食品药品检定研究院;血塞通片(云南安特呐制药股份有限公司,批号
分别为170516、160412、170937;湖南湘雅制药有限公司,批号为1704101;
昆药集团血塞通药业股份有限公司,批号为161227;湖南绅泰春药业有限公司,
批号为);乙腈为色谱纯,甲醇为分析纯,水为超纯水。
2方法
2.1色谱条件与系统适用性试验
色谱柱:XBridgeC18柱(250mm×4.6mm,3.5μm);流动相:乙腈溶液
(A)-水(B),梯度洗脱(0~20min时20%A,20~45min时
20%A→46%A,45~55min时46%A→55%A,55~60min时55%A,60~
62min时55%A→20%A,62~70min时20%A);流速:1.0mL/min;柱温:
30℃;检测波长:203nm;进样量:10μL。各相邻成分之间分离度较好(R>
1.5),理论板数按人参皂苷Rg1峰计应不低于5000。
2.2溶液制备
称取各对照品适量,精密称定,加甲醇制成含三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参
皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的混合对照品溶液。取样品10片,除去
包衣,称定质量,研细,混匀,取约40mg,精密称定,置10mL容量瓶中,溶
解并定容,摇匀,滤过,取续滤液,即得供试品溶液。按样品处方取缺三七总皂苷
的适量赋形剂制成阴性样品,按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.3方法学考察
专属性试验:取2.2项下混合对照品溶液及阴性对照溶液,按2.1项下色谱条件进
样分析,记录色谱图。结果,在各待测成分峰处阴性对照无干扰,详见图1。
线性关系考察:取混合对照品溶液适量,加甲醇稀释成不同质量浓度,按2.1项下
色谱条件分别进样10μL,记录峰面积,以峰面积(Y)为纵坐标、进样量(X,
mg)为横坐标进行线性回归。结果见表1。
表15个成分线性关系考察结果(n=3)待测成分回归方程r线性范围(mg)检
测限(μg/mL)定量限(μg/mL三七皂苷R1人参皂苷Rg1人参皂苷Re人参皂
苷Rb1人参皂苷RdY=2.6746×105X-4.2172×103Y=3.4495×105X+4.065
4×103Y=3.0229×105X-2.
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