高效液相色谱法同时测定禽蛋中4种氟喹诺酮类药物残留量 .pdfVIP

高效液相色谱法同时测定禽蛋中4种氟喹诺酮类药物残留量

林玲;杨春亮;查玉兵;刘丽丽;刘杰

【摘要】建立了一种同时测定禽蛋中4种氟喹诺酮类药物的高效液相色谱荧光检

测法.样品经磷酸二氢钾缓冲液提取两次,离心合并上清液.上清液经C_(18)固相萃

取柱净化,以流动相洗脱定容,用高效液相色谱荧光检测法测定,外标法定量.结果表明,

该方法对环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、达氟沙星的最低检出限分别为0.005、

0.005、0.005、0.001mg/kg、,方法相对标准偏差为1.48%～3.00%.平均回收率

为90%～95%.

【期刊名称】《分析仪器》

【年(卷),期】2010(000)002

【总页数】4页(P17-20)

【关键词】高效液相色谱法;荧光检测器;禽蛋;环丙沙星;达氟沙星;恩诺沙星;沙拉沙

星

【作者】林玲;杨春亮;查玉兵;刘丽丽;刘杰

【作者单位】中国热带农业科学院农产品加工研究所,湛江,524001;中国热带农业

科学院农产品加工研究所,湛江,524001;中国热带农业科学院农产品加工研究所,湛

江,524001;中国热带农业科学院农产品加工研究所,湛江,524001;中国热带农业科

学院农产品加工研究所,湛江,524001

【正文语种】中文

1前言

恩诺沙星、环丙沙星、达氟沙星和沙拉沙星均为常见的氟喹诺酮类(FQS)抗菌药物。

此类药物具有广谱抗菌、抗菌作用强、毒副作用小等特点，已被广泛用于人类、

畜禽和水产养殖业。由于氟喹诺酮类药物在动物体内的残留消除缓慢，过量的药物

残留会危害人体健康。因此，建立此类药物的检测方法很有必要。到目前为止，对

氟喹诺酮类药物残留检测方法的报道较多，有微生物法、毛细管电泳法、薄层色谱

法、气-质联用、液-质联用、液相色谱荧光法和液相色谱紫外法[1-8]等。但应用

最普遍、检测准确度好、操作较方便的方法还是高效液相色谱法。但是有关禽蛋中

氟喹诺酮类药物残留的检测方法尚未见报道。本文通过对前处理方法的摸索、流动

相的选择和色谱条件的优化，建立了一种可同时测定禽蛋中4种氟喹诺酮类药物

残留的高效液相色谱荧光法。该方法操作简单、灵敏度高、重现性好，可用于禽蛋

中4种氟喹诺酮类药物残留量的检测。

2实验部分

2.1仪器设备

Waters2695型高效液相色谱仪(配有自动进样器、2475型荧光检测器、四元泵、

真空在线脱气机、Empower色谱数据处理系统)；组织匀浆机；旋涡混合器；高

速离心机；固相萃取装置。

2.2色谱条件

色谱柱：SymmetryC18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05mol/L

磷酸/三乙胺溶液(体积比18︰82)，用前经0.45μm滤膜过滤;柱温：35℃；流速：

0.9mL/min；进样量20μL；激发波长为280nm，发射波长450nm。

2.3试剂

乙腈(色谱纯)，甲醇，三乙胺，磷酸二氢钾，氢氧化钠，磷酸。

2.4溶液配制

5.0mol/LNaOH溶液：取NaOH饱和溶液28mL，加水稀释至100mL。

0.03mol/LNaOH溶液：取5.0mol/LNaOH溶液0.6mL，加水稀释至100mL。

0.05mol/L磷酸/三乙胺溶液的配制：取浓磷酸3.4mL，用水稀释至1000mL，用

三乙胺调节pH至2.4。

磷酸盐缓冲溶液：取磷酸二氢钾6.8g，加水溶解并稀释至500mL，用5.0mol/L

NaOH溶液调节pH至7.0。

标准储备液：精密称取环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星各10mg，达氟沙星2mg，

用0.03mol/LNaOH溶液溶解并稀释成浓度为1mg/mL(环丙沙星、恩诺沙星、

沙拉沙星)和0.2mg/mL(达氟沙星)的标准储备液。

混合标准工作液：准确量取适量标准储备液，用流动相稀释成适当浓度的混合标准

工作液。

2.5实验方法

2.5.1提取

称取2g搅碎的禽蛋蛋黄和蛋清的混匀液于50mL聚四氟乙烯离心管中,加入磷酸

盐缓冲溶液10mL，在旋涡混合器上震荡混合5min，离心10min，取上清液，残

渣用磷酸盐缓冲溶液10mL再提取一次，离心。合并上清液于125mL分液漏斗

中，加入20mL正己烷，剧烈振摇，静置分层10min，取下层溶